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prgdpdlaβ-tcpngf复合材料对pc12细胞分化相关基因的调控
中文摘要
大量研究表明神经导管中添加神经生长因子(NGF)组分能够明显促进受损
神经的形态和功能恢复。用生物相容性良好，体内降解性能优异的材料作为基
材复合神经生长因子是常用的缓释体系制备方法。本实验即利用自行设计的
RGD接枝的聚(羟基乙酸．L．赖氨酸哥L酸)高分子材料，复合13．磷酸三钙、聚乳酸
作为缓释基材，在有机溶剂中物理混合NGF冻干粉制得NGF缓释材料
12
分化相关基因的调控。
在体外实验中，分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定材料浸提液中NGF
的含量，并通过用第1天浸提液诱导PCI2细胞分化，测量PCI2细胞最大直径、最
长突起长度和突起数目来观察其形态学上的变化。研究结果显示：RGD复合材
料中NGF的释放分为两个阶段—扩散阶段和降解阶段；材料在第1天出现NGF的
100ng／mlNGF浓度处理PCI2细胞3天，形态学结果显示细胞最大直径、最长突起
长度和突起数目与对照组细胞存在明显统计学差异，出现明显分化。
分别用第1天浸提液处理PCI2细胞1天，2天，3天，收集细胞提取总RNA样
的TrkA，Rab．1，VGF，GAP43和B．Tubulin
II基因mRNA表达随时间的变化规
律。实验结果表明，各基因mRNA表达量大量提高，其峰值出现在第2天。
研究结果显示：RGD复合材料通过扩散一降解模型缓慢释放神经生长因子
而引起细胞内促进分化相关的基因大量表达并最终导致PCI2细胞分化成交感神
经元样。RGD复合材料有明显的NGF缓释作用，并在一定程度上保存NGF的活
性，材料浸提液中NGF在诱导PCI2细胞分化中起到显著作用。
关键词：神经生长因子； 外周神经修复；实时荧光定量PCR；PCI2细胞
Abstract
releaseofneIve nerve conduit
Prolonged growth guidance
factor(NGF)from
enhance nerve ondiffusionofNGFfrom
may peHpheral
regeneration．Based
novel materialwithsustainedNGFreleaseWas
degradablematerial，angrverepair
NGFintoa RGD-modifiedwhichhas
preparedbyembedding degradable composite
cell and work
good affinity
WastoevaluatethemRNA ofdifferentiation-related
expressionresponses genes
whenPC12cellswere totheextractofnerve conduR
exposed guidancecomposite．
／n NGFreleasewas immunosorbent
vitro，the enzyme-linked
quantifiedusing
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