第02章 色谱法分离原理.ppt

第二章 气相色谱分析 第一节 色谱法概述 第二节 气相色谱分析理论基础 第三节 色谱分离条件的选择 第四节 固定相及其选择 第五节 气相色谱检测器 第六节 气相色谱定性和定量分析 第七节 毛细管柱气相色谱法 第一节 色谱法概述 一、色谱法简介 　　 色谱法是1901年由俄国植物学家茨维特（Tsweet）提出，最初的认识是在于它的分离价值，用于分离植物中的色素等有色物质。现代的发展，不再局限于有色物质，而且大量用于分离无色物质。 俄国植物学家Tswett（茨威特）首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值，他一生从事植物色素的提纯与分离工作。 ——1901年开始色谱分离方法研究 1903年3月21日在华沙自然科学学会生物会议上提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法。（论文：一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用） W. S. Tswett, Tr. Protok, Varshav. Estesvoispyt. Otd. Biol., 1903, 14. 20年后，即1923年以后，Kuhn和Lederer为了证实蛋黄内的叶黄素系植物叶黄素与玉米黄质的混合物，参考了茨威特的文章后，采用了色谱法，他们采用CaCO3填充柱成功的从蛋黄中分离出了植物叶黄素。——他们的工作证实了茨威特的方法可以用来进行制备分离。 从此以后，色谱法被广泛的用于各种天然有机化合物的分析与分离。 1940～1943年，瑞典科学家Tiselius（蒂西利斯）和英国科学家Synge（辛吉）创立了液相色谱的迎头法与顶替法。并由于在吸附色谱、电泳等方面做出了重要贡献，使Tiselius获得了1948年的诺贝尔化学奖。 1941年，英国科学家Martin（马丁）和Synge（辛吉）在研究氨基酸的分离时又发展了液-液分配色谱法，开创了分配色谱的新阶段，他们因此获得了1952年的诺贝尔化学奖。 1952年，Martin和James采用了自动滴液仪作检测器分析脂肪酸，开创了气体作流动相的气-液色谱法。他们采用涂渍在惰性载体上的高沸点液体为固定相，以溶解分配原理代替了吸附分配原理，大大的扩展了气相色谱法的应用范围，弥补了吸附剂种类不多的缺陷。因此，他们在分析化学界产生了巨大的影响。 1958年，Golay（戈雷）提出了分离效能极高的毛细管气相色谱法。 从此以后，气相色谱技术得到了广泛的应用，蓬勃发展起来。 随着对色谱法的深入研究和相关技术的不断发展，新一代的色谱方法不断的涌现： 离子色谱: 20世纪70年代出现了采用自动电导检测器分析痕量正负离子的新式离子交换色谱。 超临界流体色谱：Klesper等人1962年提出， 20世纪80年代后开始应用毛细管柱。目前已成为填补气相色谱与液相色谱之间空白的主要手段。 毛细管电泳： 20世纪80年代发展起来，结合了电毛细管技术及色谱微量检测方法，运用在电场中离子迁移速度不同的原理进行分离分析。 5.塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。 该理论是在理想情况下导出的，未考虑分子扩散因素、其它动力学因素对柱内传质的影响。因此它不能解释： 峰形为什么会扩张？ 影响柱效的动力学因素是什么？ 在检测器内装有一个圆筒状β放射源如63Ni为负极，另一电极为正极，两极之间用聚四氟乙烯绝缘，极间施加直流或脉冲电压，极间距离根据放射源和供电形式精确确定。 当载气（氮气或氩气）进入检测室，受β放射源发射出的β粒子（初级电子）的不断轰击而电离，生成正离子和次级电子。 当外加电场存在时，初级电子和次级电子向正极迁移并被收集，形成一恒定的微电流（10-9—10-8A)，即检测器的基始电流，简称基流。 定性分析：在实验条件下，进0.3微升的二甲苯试样，得到色谱图．分别进已知纯样品测定保留时间，与未知样色谱峰的保留时间对照定性，确定色谱图上各组份峰号代表组份. 作业 P61-63 20,21,26,28,29,30 21 解 (1) 图中 tR2=17min, Y2=1min, n = 16(tR2/Y2)2 =16×172 = 4624 (2) t’R1= tR1- tM =14-1=13min t’2=tR2 – tM = 17-1 = 16min (3) (R2/R1)2=3/L L=0.75m 6、具有定性功能的检测器（联用技术） 质谱作为色谱的检测器使用需要解决四个问题： （1）色谱柱出口压力与质谱仪高真空之间的匹配； （2）试样组分与载