猪繁殖和呼吸综合征病毒四种检测方法的比较.pdfVIP

摘 要 摘 要 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸征病毒(PRRSV)引起的高度接触性 病毒传染病，以妊娠母猪、公猪生殖障碍及仔猪呼吸障碍为特征的疾病，是严重危害全球养 猪业的疾病之一。该病毒PRRSV可分为美洲型和欧洲型，我国现存的PRRSV大多数为美洲 型PRRSV。本研究建立了四种美洲型病毒的病原学诊断方法，并对它们进行了系统分析。 研究表明N蛋白是PRRSV病毒粒子中含量最多的病毒蛋白，也是免疫原性最强的蛋白。 ELISA和PRRSVIFA检测方法，用于病毒的 本研究应用抗PRRSVN多抗，初步建立了PRRSV 检测。本实验所建立的ELISA方法，最佳病毒包被稀释度为1120(此时包被的病毒量为0．093 gg／gL)， 有PRRSV病毒样品，结果为阳性，猪细小病毒阳性样品、猪伪狂犬病毒样品、猪圆环病毒样 品，结果均为阴性。在临床样品的检测过程中，ELISA方法的检出率为20％，与标准通用的 RT-PCR检测结果要高；IFA方法在接种300个TCID50细胞毒／100 o,L情况下，最佳一抗二抗稀 释倍数分别为1／400，1／400，此方法在临床样品的检测过程中，检出率为7．5％，与标准检测 结果差距较大，表明此方法并不是很敏感。 稀释的病毒RNA(从病毒液中提取的)，分别进行检测，结果可知该RT-LAMP检测方法的敏感 I．tg／pL病毒RNA。在特异性实验中，两种检测方法可以准确的区分PRRSV和其他猪病病毒， RT-PCR检测结果分别为：阳性样品4，阴性样品36；阳性样品5，阴性样品35；阳性样本5， 与ELISA和IFA检测方法相比较，病毒核酸检测方法的准确性和检出率都比较理想，并且更加 省时方便，可作为有效的候选检NPRRS的手段。 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒；检测方法；ELISA：IFA；RT-PCR：RT-LAMP of American fourtestsforNorth of Establishment type and virus syndrome respiratory reproductive porcine Abstract of thecausative Porcine and agentporcine virus(PRRSV)is reproductiverespiratorysyndrome ofthe infectious and isconsideredone important syndrome(PRRS)．PRRS reproductiverespiratory diseaseisassociatedwith failureinsowsand diseaseso