人白细胞介素18基因的克隆和表达.pdf

中文摘要 白细胞介素18(inter】eukin—l 8，1L一】8)是一种新发现的具有多种活性的细胞因子，在结构 上与】L．1相似，在功能上与JL一12相似，其昂具特征的活性是诱导Y一干扰素(1FN叫)的产生， 促进T细胞和自然杀伤(NK)细胞的增殖，同时增强NK细胞的杀伤力，并具有抗肿瘤和抗微 生物感染等多种疾病的作用，这些特性预示lL．18可做为一种治疗因子，因此对该因子的克隆与 表达在实际应用于临床之前有重要的意义。本研究应用现代分子生物学的研究手段和方法研究了 如下内容： 1．人白细胞介素18基因的克隆及序列分析从正常人肝脏组织中提取RNA，然后反转录成 cDNA，应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PcR)技术，自行设计并合成一对特异性引物，成功地 扩增出hIL-18 cDNA基因，并定向插入pGEM-T载体中，然后经PcR鉴定及限制性内切酶双酶 切鉴定，鉴定正确的质粒进行序列测定，用DNAstar软件将所测得的序列与原预期基因序列比 较，核苷酸序列基本一致，表明所构建的人白细胞介素18基因序列是正确的。 2．人白细胞介素18基因在大肠杆菌中的表达及其多克隆抗体的制备在获得人白细胞介 阳性重组质