PF40基因与REB转录因子转化小麦的研究.pdfVIP

摘 要 PF40基因是从谷子未成熟种子cDNA文库中获得的一个与分蘖发育密切相关的基因。为探讨 该基因对小麦的影响，以分蘖特性差异明显的Y18和$99-6123两个冬小麦品种为受体材料，用 带有PF40基因和bar基冈的质粒轰击小麦幼胚愈伤组织。经含有5mg／LBasta的培养基上四次 抗性筛选后移栽温室，共获得613株再生植株，经PCR检测共获得43株阳性植株，PCR阳性转 化率为6．61％。将T0代26个转基因植株的种子种成T-代株系，从转基因后代中随机选取19株进 行的Southernblot分析，初步断定Southern 分析，证明PF40基因已经整合到小麦基因组中并且可以遗传。用统计学中X2测验来检测26个株 PF40基因在后代中得到较稳定遗传，并以显性方式遗传给后代。同时对T-代转基因植株进行分 蘖和成穗数的调查结果显示，Y18正义、$99-6123正义、干扰载体与对照均有显著性差异，只有 Y18干扰载体与对照的差异不显著，以上结果表明PF40基因对小麦的分蘖具有一定的调空作用。 以冬小麦品种轮选987幼苗的茎尖分生组织为受体，通过农杆菌介导法将与抗逆相关的逆境 达到9．09％。T。代检测结果表明，所转基因已经稳定遗传给后代，并且所得株系基本符合孟德尔 分离比3：1。 本研究表明将PF40基因导入小麦对小麦的分蘖数和成穗数存在一定的调节作用。同时，利 用优化的农杆菌介导基因转化体系，较好地克服了小麦转化受体的基因型障碍，提高了小麦的基 因转化效率。 关键词：小麦，PF40，DREBlA转录因子，基因枪转化，农杆菌介导，幼胚，茎尖分生组织 Abstract vector The Pc3300IS—DREBIA35S by promoter vector， plasmidexpression promoted expression Ubi vectors sense(pAHC40)andkaockout(pAHCRNAi)PF40by promoterexpression genepromoted wereconstructedandusedtowheat transformation study． PF40 fromtheeDNA immature of seeds．ofmillet,wasassumedtorelatedto gene，cloned library the ofcereals．Tomore of informationaboutthefunctionPF40 and tilleringability gain gene,sense knockoutPF40 withbar wastransformedinto4000 ofthe gene gene youngembryoswinterwheat linesYl8and$99-6123whichhavedifferent bomb甜dmenLThere filletingabilitybymieroprojectile wefe613transformed afterresistanceselectionOiltheMSmedium plantsregenerated