清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳创新.pptVIP

血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 生物化学实验之四 一、实验目的与要求 了解电泳技术的一般原理 学习醋酸纤维素薄膜电泳操作技术 测定人血清中各种蛋白质的相对百分含量 二、实验原理 1.电泳 是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。 在一定pH条件下，不同的蛋白质由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同，因此，可使它们分离 2. 影响电泳迁移率的因素： 内在因素：蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状 外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象 3.醋酸纤维素溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均一的泡沫状的结构，厚度约为120 μm，有很强的通透性，对分子移动阻力很小。该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点 4. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带，从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，经染色可计算出各蛋白质的百分含量。 三、实验器材 1. DYY-6C型 ?双稳定时电泳仪和DYY-Ⅲ型电泳槽，均为北京市六一仪器厂生产 2. 醋酸纤维薄膜（2 cm×8cm） 3. 培养皿：一排桌子公用5套，包括平衡、染色各用一套