诺氟沙星影响单碳纳米管对人体肺细胞的毒性效应以及对其致毒机制的研究.pdfVIP

谨以此文献给所有关心和帮助我的人 门劭坤 万方数据 万方数据 万方数据 诺氟沙星影响单壁碳纳米管对人体肺细胞毒性效应以及对其致毒机制的研究 诺氟沙星影响单壁碳纳米管对人体肺细胞的毒性效应以及 对其致毒机制的研究 摘 要 由于独一无二的一维中空纳米结构以及优异的电学、力学和热学等特性，碳 纳米管 （Carbon nanotubes, CNTs ）可以广泛应用在复合材料、电学和纳米医学等 领域。随着碳纳米管产品的生产、使用的大幅度增长，专业人员和公众接触碳纳 米管的几率明显增大，其中，CNTs 还可能与环境中的一些有机污染物形成复合 污染，导致其健康可能会受到比碳纳米管更大的威胁。肺部作为碳纳米管进入人 体后主要沉积器官之一，CNTs 对其毒性效应及其响应机制是目前毒理研究的热 点。细胞是生物体的基本的结构和功能单位，离体培养时具有试验周期短、灵敏 性高、培养条件易于掌控等特点，并且利于从分子角度阐释致毒机制。因此，本 研究选取人体肺细胞（A549 ）作为受试细胞 ，探究在诺氟沙星（Norfloxacin ， NOR ）的影响下，单壁碳纳米管（single-walled carbon nanotube ，SWCNT）对其 毒性效应以及其响应机制。主要研究结果如下： （1）随着暴露时间的增长，SWCNT 对A549 细胞的毒性效应在24h 时变化最 明显；暴露于SWCNT 24h 后，随着浓度逐渐增加，A549 细胞存活率逐渐降低， 其半数抑制浓度（IC50 ）为65mg/L 。因此，进一步的细胞毒性实验选取SWCNT 浓度为65mg/L 。 （2 ）浓度在0-40mg/L 范围内的NOR 对A549 细胞没有毒性效应。65mg/L 的 SWCNT 对40mg/L 的NOR 的吸附在24h 时达到平衡。平衡后，NOR 溶液中的 SWCNT 对A549 细胞的毒性效应降低。 （3 ）通过添加内吞抑制剂，在激光共聚焦荧光显微镜（LCFM ）下观察到A549 细胞对SWCNT 的摄取量明显降低，表明内吞作用可能是SWCNT 的跨膜方式之 一。当其进入细胞后，利用透射电子显微镜（TEM ）发现 SWCNT 单独作用细 胞时，其主要分布在溶酶体和细胞质中；SWCNT 和NOR 共同作用细胞时，其 主要分布在细胞质中。 I 万方数据 诺氟沙星影响单壁碳纳米管对人体肺细胞毒性效应以及对其致毒机制的研究 （4 ）SWCNT 可以诱导A549 细胞产生大量ROS ，短时间内使细胞内H O 、 2 2 OH• 的含量显著增大，产生氧化胁迫，刺激A549 细胞产生反馈调节，提高了CAT、 SOD 酶的活性，从而加强对过量自由基的清除能力，增强了细胞对外环境的防 御能力。但是，随着时间的增长， ROS 会继续积累，引起细胞脂质过氧化，从 而使细胞膜稳定性降低，膜结构受损，导致乳酸脱氢酶的释放。 （5 ）当SWCNT 与NOR 共同作用细胞时，与SWCNT 单独作用相比，诱导 A549 细胞产生的ROS 的量减少，MDA 的含量降低，乳酸脱氢酶的释放量下降， 从而对细胞的整体毒性减弱，这可能是其毒性较小的主要机制之一。 关键词：单壁碳纳米管，诺氟沙星，人体肺细胞，细胞毒性，吸附，氧化胁迫 II 万方数据