内蒙古西部地区面团中酵母菌和乳酸菌的分离鉴定及其生物多样性研究.pdfVIP

摘 要 本研究对内蒙古西部地区酸面团中的酵母菌和乳酸菌进行了分离和鉴定，并结 合PCR-DGGE方法对其生物多样性进行了研究，为保护内蒙古西部地区酸面团中丰富 的微生物资源和进一步开发利用酸面团中酵母菌和乳酸菌资源提供了基础数据。 内蒙古西部地区7个盟市28份酸面团样品的pH值为2.78-5.13，滴定酸度值 (TA) 为8.30-15.50mL ；样品中乳酸菌总数为6.56-8.72 Log cfu/g ，酵母菌总数为 4.13-6.37 Log cfu/g，样品中酵母菌的数量比乳酸菌的普遍低2个数量级。 从 28 份酸面团样品中共分离出酵母菌 85 株，采用 26S rDNA D1/D2 序列分析法 鉴定结果为：43 株酿酒酵母（S.cerevisiae，50.59% ）、22 株矮小假丝酵母 (C. humilis，25.88%）、6 株德布尔有孢酵母 (T.delbrueckii)、3 株异常毕赤酵母(P. anomala) 、2 株 海洋酵母 (K.exigua) 、2 株 库德里阿兹威 (氏) 毕赤酵母 (P.kudriavzevii)、2 株近平滑假丝酵母 (C. parapsilosis)、2 株洛德酵母 (L. elongisporus) 、1 株淀粉毕赤酵母 (P. farinosa) 、1 株季也蒙毕赤酵母 (P. guilliermondii)、1株粘性红圆酵母 (Rh.mucilaginosa)；共分离到乳酸菌 108 株， 采用 16S rDNA序列分析法鉴定结果为：37 株植物乳杆菌（L.plantarum，33.94%）、 14株柠檬明串珠菌 (Le.citreum，12.84%）、10 株食窦魏斯氏菌（W.cibaria）、8 株 类消化乳杆菌 (L.paralimentarius)、7 株融合魏斯氏菌(W.confusa)、7 株瑞士乳杆 菌（L. helveticus）、4 株明登乳杆菌(L.mindensis)、3 株乳酸乳球菌乳酸亚种 (Lactococcus lactis subsp. lactis)、3 株弯曲乳杆菌 (L.curvatus)、3 株红色乳 杆菌 (L.rossiae) 、2 株 肠膜明串珠菌 (Le.mesenteroides) 、2 株短乳杆菌 (L.brevis) 、 2 株 贵 州 乳 杆 菌 (L.guizhouensis) 、 2 株 旧 金 山 乳 杆 菌 (L.sanfranciscensis) 、2 株 壳状乳杆菌 (L.crustorum) 、 1 株 发酵乳杆菌 （L.fermentum）、1株耐久肠球菌（E.durans）。 结合 PCR-DGGE 方法研究了 28 份酸面团中酵母菌和乳酸菌的生物多样性，结果 表明 S.cerevisiae 和 L.plantarum、L.sanfranciscensis 分别是样品中优势酵母菌 种群和优势乳酸菌种群，并发现经典分离鉴定法和 PCR-DGGE 法在研究同一个酸面团 样品中微生物多样性时有很大的差异性：前者会因操作人员主观因素造成 目标微生 物种群的丢失，分离数量也会受到影响；而后者受到检测极限和样品中死细胞的影 响，结果会有一定的偏差。所以结合该两种方法的优缺点才能准确和全面地描述内 蒙古西部地区酸面团样品中微生物的组成。 关键词：酸面团；酵母菌；乳酸菌；分离；鉴定；变性梯度凝胶电泳；生物多样性 Identification and Biodiversity of Yeast and LAB Isolated from Sourdoughs Collected fromWestern Region of Inner Mongolia Abstract The yeast and lactic acid bacteria （LAB ）in sourdoughs collected from west of Inner Mongolia were isolated and identified, after that the diversity of yeast and lactic acid bacteria were analyzed by culture-dependent method and denatur