流式细胞术检测乳中大肠杆菌数及细菌总数的研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的：生乳营养物质丰富，微生物繁殖速度快。传统的检测方法操作繁琐、耗时长，给 企业的正常生产带来不便，甚至经济损失。所以要求一种能在短时间内检测出微生物的方法。 本课题旨在研究利用流式细胞术快速检测生乳中的细菌总数和大肠杆菌两个微生物指标。 方法：本研究首先建立生乳前处理方法用来排除生乳中大颗粒物质对流式细胞仪检测的 ADC操作系统上建立微生物的检测程序；利 对染色条件进行摸索；在流式细胞仪的EXP032 用流式细胞术检测细菌总数、大肠杆菌分别与平皿菌落计数法、MPN法进行比较分析。 结果：研究结果如下： 0．1M 1山，50。C消化15mira加800p1 蛋白酶K(20mg／m1)5I_tl、TritonX-100 淀即细菌1。 处理的参数为100℃沸水浴10rain。 PBS适当稀释；利用EXP032ADC操作系统进行分析。 3．流式细胞术检测生乳中大肠杆菌的检测流程：生乳前处理；用稀释倍数为100倍的荧 光抗体ab30522 100p1染色20min，0．1M 析。 4．流式细胞术检测生乳中细菌总数的检测时间为40rain；流式细胞术检测生乳中大肠杆 菌的检测时间为60rain。 5．流式细胞术的最低检测限为单位体积1个细胞；样品中细菌浓度的检测上限是 2，4x107／ml，检测结果接近2．4x107／m1的样品应该适当稀释再进行检测。 6．将流式细胞术检测生乳中细菌总数与平皿菌落计数法进行比较，结果表明两者呈正的 法检测结果的对数值具有显著的相关性rr=D 一1．4718。 结论：流式细胞术能够极大程度上缩短检测时间，能够达到生乳样品进行在线检测的要 求。流式细胞术的结果与传统方法检测的结果具有显著的相关性，结果可靠。 关键词生乳；流式细胞术；细菌总数：大肠杆菌 StudiesontheFlow Methodto Cytometry in Milk DetectMicrobialIndexesRaw Abstract is which and milkrichinnutrition，in very Objective：Raw microorganismgrowspropagates inconveniencesfor fast．TraditionaIdetectionmetIlodsarelabourious．which bring enterprise’S method candetectthe ina routinemanufacturesandeconomiclOSS．Soa which microorganism shorttimeis ofthis istomakeresearchonthedetectiononthetotal objectivestudy required．The bacteriaandE．coli．