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安徽砀山地区梨质资源的rapd研究
摘 要
安徽砀山地区梨资源丰富,砀山酥梨在世界水果市场占据重要地位。由于梨遗传
背景复杂,种内变化大,加上种间杂交,使砀山地区梨在长期的进化和栽培中形成了
丰富的资源类型。对砀山地区梨种质资源进行研究,以达到合理利用这些资源,对加
侠梨育种进程有重要意义。
本试验调查并收集了砀山地区梨24个资源类型,进行IuPD研究,主要结果如
下:
度、颜色、产率、电泳,扩增结果等比较,认为cTAB法更适合梨基因组DNA提取。
分析的DNA:韧皮部和芽用上述两种方法提取,DNA产率均较低,
u
2、用正交设计筛选出适合梨树的RAPD反应参数为:在25I反应体系中,模
Bu最r
5×10。9mol、10xPCR
板DNA 2.Ou 5×
60ng、弓l物4pmol、dNTPs l、MgCl2
10—8m01、Taq酶1.0u。
3、运用6个引物的特异带构建出的梨DNA指纹图谱,可区分14个生物型中的
9个。用8个引物的带型组合构建的指纹图谱,可将这14个资源类型全部区分,
4、从60个随机引物中筛选出40个表现稳定的引物进行PcR扩增。砀山地区梨
种质资源聚类分析表明。当阀值为69.6~70.4时,全部生物型可分为5类。第~类:
砀山酥梨及其变异、鸭梨、雪花梨、莱阳慈梨和紫酥,主要是自梨;第二类:新高、
丰水、二十世纪、皇冠和苍溪梨,除皇冠外,都为沙梨:库尔勒香梨和红香酥聚为一
类;伏酥和豆梨各为一类。
1375bp,s辩
5、逐步判别分析显示,尉sher判别函数值只与引物sⅣj50D印,%8
4个位点有关,判别函数为:
947bp和S1461831bp
YI=一27XI+18X2·18X3+18X4-19.609;
Y2_9X1.3,60×10。5X2+3.597×10‘15X,.3.60×10。’X4—5209:
5X3-13.5)(4一19,609;
Y3=31.5X1.13.5X2十22
Y4=31.5Xl一4.5X2+40.5X3—22.5)(4—35.359。
6、砀山酥梨的8个变异类型,用60个随机引物进行IuPD分析,与对照相比,
变化的条带为:良梨旱酥29条,锈酥z0条,绍皮繇6条,扁酥4磊,黄花酥3象r
棱酥2条,王酥1条,八怪酥无交化带。
关键词:梨: 种质资源; 聚类分析; 判别分析: 指纹图谱
Abstract
Thereare
abundant
pear
resources血Dangshall
CourI吼Anhuiprovince.TheyieIdof
su share
Dangshall intheworld
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