福建余甘子（pyllanthus emblica l.）遗传资源的rapd分析.pdfVIP

绫写词 中文摘要 本研究以福建省34份余甘子遗传资源为材料，摸索出适合余甘子叶片基 鞠组DNA豹提取方法；建立帮优化了余甘子RAPD反痘体系；筛选出具商品 种(或单株)特异性的RAPD标记；采用RAPD标记，结合聚类分析，进行 7福建雀余营子速铸蜜源秘装缘关系与遗砖多样蛙磅究。主要磺究结果如下： 一、余甘予叶片DNA提取方法的建立。针对余甘子叶片富含多酚类、多糖、 色素等耘疆，荔与DNA绩食成复合躲，难溶解，又翕麴制孙g瓣话牲，觚嚣 影响PCR扩增。本研究采用改良的SDS法，以新鲜幼嫩的余甘予叶片为材料， 同时又在提取液中加入3％PVP，有效她克服消除了酚类物质的干扰，麸余甘 子时片中提取了较燕纯度和产量的DNA，适斑作为余甘子的RAPD分析． 二二、余甘子RAPD反应体系的优化。在参考一般RAPD分析的反应程序的基 纯静余曹子RAPD反座俸蓉秀：谯扩增反疵慧体积2§pL牵，惫含0。6 utool·L～dNTP、300 mmol·¨‘M92‘、500 nmol·L’’引物、25ng模板DNA、 1，25UTaqDNA聚合酶。 三、余剪子RAPD标记的雾态性稷发分析。采用20个具特异扩增的多悉性 引物对福建省34份余甘子熬因型进行扩增，20个引物，在34份供试材料中 憨筵扩增出259个袋赢，虽蚜是多态的，多杰性程度达100％，警均每个Sl麴 扩增12．95个位点。各供试材料之间的遗传距离范围为0-1，其中栽培品种与 瓣生蜜添之闰遗黉距离在0．《3一l之淹；营瓣余曹资滚与墓安余学费滚之润 遗传距离为0．27珈．99。 龋、品种(或单撩)特异饿RAPD标记的筛选与品种髓鄹。采用20个蒜特 异扩增的多态性引物对所有供试材料进行扩增，获得了19个引物对23份材 2 特缓RAPD标记。 五、福建余甘遗传资源的RAPD标记的浆类分析。采用ED(欧氏距离)法 逶纷聚类分援羹l露耱籀建34爨余营子遗终资漂朝最划分为意安余嚣和蔫毽余 甘两大类。而采用Cosine距离法计算样品间的距离则全部供试的34份余甘予 基戮型可明撼区分荛三大类，羧培晶静全部扫为一夫类，惠安野囊余曹子为 另～大类，锵田野生～号单独归为一类。 关键词：余甘子；RAPD；聚黉分析：品种鉴别；遗传多样性；亲缘关系 RAPD of emblica L．) AnalysisEmblic(Phyllanthus in GeneticResourcesProvince Fujian Abstract Inthis 34accessionsofP^yllanthusemblica resourcesin experiment L．genetic wereusedas methodofleafDNAextractionwas Province materials．The Fujian thentheRAPDreaction wasestablishedand developed；and system optimized；the RAPDmarkerswere the cultivar(orline)specific screened；andgenetic and of emblica in relationshipgeneticdiversityPhyllanthu