罗非鱼下脚料和粕混合发酵生产新型饲料蛋白的研究.pdfVIP

罗非鱼下脚料和豆粕混合发酵生产新型饲料蛋白的研究 摘 要 罗非鱼下脚料为优质的动物蛋白源，豆粕是应用最广泛的植物蛋白之一。目前， 罗非鱼下脚料加工处于初级阶段，且多数用作鱼粉，由于工艺、设备落后，产品质量 不高。随着全球养殖业的不断发展，鱼粉供应量难以满足整个养殖业的需求，不但使 鱼粉价格不断飙升，养殖成本相对升高，直接经济效益减少，也极大地影响了养殖 者的积极性，积极的寻求替代鱼粉的优质蛋白原料是保证养殖业持续发展的关键。 针对鱼粉短缺的现状，本研究将罗非鱼下脚料和豆粕混合，加入益生菌、酶及微 量元素进行发酵。研究了复合菌种接种量、非淀粉多糖酶、中性蛋白酶、微量元素对 发酵效果的影响，探讨了发酵过程中蛋白水解度、胰蛋白抑制因子和植酸的降解、蛋 白分子量分布、微量元素螯合率等变化的情况，旨在将动物蛋白与植物蛋白进行完美 融合，利用微生物产酶、外加酶及水产蛋白中丰富的内源酶作用，将原料蛋白充分降 解，得到一种蛋白含量高，氨基酸平衡，富含小肽物质的新型饲料蛋白，有望替代鱼 粉，为解决我国鱼粉紧张的局面，降低养殖成本，提供参考。其主要结果如下： （1）通过单因素试验, 以水解度为指标,确定了豆粕和罗非鱼下脚料的物料比为 1:1。根据正交试验得复合菌种的最佳接种量为: 枯草芽孢杆菌接种量为0.6‰，酵母 菌接种量为0.06‰，乳酸菌接种量为0.0015‰，在此条件下,水解度可达27.27% 。胰 蛋白酶抑制因子随着枯草芽孢杆菌和酵母菌接种量的增加而减少，随着乳酸菌接种量 增加而增加，最大降解比例为65.2% 。植酸的含量与三种菌的接种量成正比，最大降 解比例为53.3% 。通过SDS电泳和高效排阻体积色谱对蛋白分子量进一步分析 显示，罗非鱼下脚料蛋白有很好的降解效果，豆粕7s 抗原蛋白降解充分，11s 抗原蛋 白未完全降解，5000 Da 以下比例为19.5%，1000Da 以下所占比例仅为4.9% 。 （2 ）四种非淀粉多糖酶（木聚糖酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶）对发 酵影响的研究显示，除木聚糖酶对水解度有促进作用，其他三种均没有促进作用。通 过响应面设计，得到添加中性蛋白酶发酵的最佳条件为中性蛋白酶添加量 0.1%，温 度40 ℃，时间53h，在此条件下得到的水解度为31.94% 。应用SDS电泳和高 效排阻体积色谱对发酵产品蛋白分子量进一步分析显示，加酶发酵对罗非鱼下脚料和 豆粕都有很好的降解效果，5000 Da 以下比例为 32.08% ，比菌种复合发酵提高 12.58%。1000Da 以下所占比例提升到12.26% 。发酵产品铜、锰、铁、锌四种微量元 素含量均比鱼粉中含量低。 （3 ）在上述基础上探讨四种微量元素对发酵的影响，采用Box-Behnken 设计优化 了四种微量元素提高水解度的条件，得到：Cu2+ 添加量为 40mg/kg, Mn2+ 添加量为 I 450mg/kg,Fe2+添加量为900mg/kg, Zn2+添加量为400mg/kg ，此时，水解度可达34.68% 。 分析添加量与螯合率的关系，结果显示：随添加量的增大，铜离子螯合率增大，锰离 子螯合率先增大后减小，铁离子和锌离子螯合率都下降。 （4 ）对发酵产品的营养成分、安全性指标进行了分析。结果显示：产品呈黄褐色， 组织蓬松，有明显的鱼香味；蛋白质含量 51.42% （干基54.98% ），接近二级鱼粉， 胃蛋白消化率达95.26%，胰蛋白抑制因子降解率为89.13%，植酸降解率为61.2%； 产品水解氨基酸含量为 42.11 ，必需氨基酸占36.14%；产品游离氨基酸为3.921，必 需氨基酸占43.3% 。通过高效排阻体积色谱显示，5000Da 以下比例为37.59%，1000Da 以下所占比例为13.19%。菌落总数及重金属含量均符合国家标准。 关键词：罗非鱼下脚料，豆粕，发酵，水解度，抗营养因子，饲料蛋白 II Study on the Mixed Fermentation of Tilapia Byproducts and Soybean Meal for New Protein Feeds