纳米磷酸钙生物瓷的制备及其生物学效应研究.pdfVIP

纳米磷酸钙生物陶瓷的制备及其生物学效应研究 生物医学工程专业 博士研究生王辛龙 指导教师张兴栋 硬组织修复用磷酸钙生物陶瓷材料一直是国内外生物医学材料领域研究的 主要课题之一。磷酸钙是自然骨的无机组成，不仅具有良好的生物相容性，且 能与新骨形成化学键性结合，还可诱导骨组织再生。骨组织中的磷酸钙主要以 纳米微晶有序沉积在骨胶原基质中，存在着大量的结构缺陷。目前应用的磷酸 钙陶瓷主要通过高温烧结工艺制备，结晶完善、过于稳定但活性欠佳，结构和 性能与自然骨矿物相差甚远。纳米磷酸钙与骨磷灰石在组成、结构和尺度上的 相似性，使得纳米磷酸钙陶瓷有望成为一种生物学性能优良的骨修复材料。 纳米磷酸钙生物陶瓷研究的主要问题是如何获得具有纳米尺度晶粒的陶瓷 烧结体以及评价纳米晶粒所导致的生物学反应。纳米磷酸钙陶瓷的制备，应有 纳米尺度的磷酸钙粉体。纳米磷酸钙粉体具有高度的表面活性，极易团聚，通 常条件下难于获得纳米尺度的固态粉体。抑制烧结过程中纳米磷酸钙晶粒的长 大，是制备工艺的又一难题。本文以纳米尺度的磷酸钙浆料为原料，通过对其 流变性能及影响因素研究、双氧水发泡成型工艺优化，利用浆料直接成型来制 备纳米磷酸钙初坯体；通过对微波烧结保温体的设计和烧结工艺的优化，应用 微波烧结工艺成功地获得了晶粒尺寸小于lOOnm的多孔纳米磷酸钙陶瓷；通过 不同晶粒尺寸的磷酸钙陶瓷的体外蛋白质吸附、成骨细胞培养实验，以及材料 植入非骨部位的体内实验，初步评价了其生物相容性，探察了晶粒尺度对其生 物学性能的影响；研制出具有骨诱导性的纳米磷酸钙骨支架材料。 采用液相沉淀法，获得了颗粒尺寸在纳米尺度的磷酸钙浆料。本文通过合 成工艺参数优化，选择聚丙烯酸作为合成添加剂，所得浆料中颗粒分布均匀， 平均粒度约为80hm。 以未经干燥的羟基磷灰石浆料为原料，通过添加剂对体系的流变性能研究， 获得了具有良好稳定性、流变性和触变性的HA浆料分散体系。研究结果表明： 添加甲基纤维素、聚丙烯酸、聚乙烯醇及聚乙二醇，都会使浆料呈现出假塑性 流体特性。其中聚乙二醇、聚乙烯醇、甲基纤维素体系的分散机理为空间位阻 效应，聚丙烯酸体系的分散机理为静电位阻效应。在实验研究范围内制备稳定 的HA浆料，添加剂聚乙二醇、聚乙烯醇、甲基纤维素、聚丙烯酸的最佳用量 入使浆料的Zeta电位达到一60及．70mV，大大改善了磷酸钙浆料的流动性与稳 定性，甲基纤维素的加入还使浆料的触变性显著提高，从而有助于形成理想的 孔隙结构。进一步通过对双氧水发泡成型工艺的条件研究，优选得出发泡成型 过程适宜的温度为40～50’C，并制得了孔隙率适宜，孔隙结构较为理想的陶瓷 烧结的初坯体。 在烧结工艺方面，选用了微波烧结工艺。自行设计了SiC保温体，并选用 石墨作为埋粉，有效地提高了磷酸钙材料吸波能力，大大提升了磷酸钙陶瓷的 烧结性能，促进了微波烧结技术在生物陶瓷领域的应用。通过上述设计，获得 了多孔纳米磷酸钙陶瓷(晶粒度小于100rim)。确定的优化烧结条件是：微波 烧结温度为1050℃，比常规烧结工艺低大约100。C，保温时间1分钟，从而避 免了烧结过程中晶粒长大的问题。制得的多孔磷酸钙陶瓷，可满足诱发材料骨 诱导性的孔隙结构要求，大孔、微孔相互贯通。材料的抗压强度达到 6．010．0MPa(样品孔隙率为65％)。 研究所获得的多孔磷酸钙陶瓷样品进行了体内、外生物学研究。体外成骨 细胞培养、蛋白吸附及体内实验结果表明：陶瓷晶粒尺度和相组成对于材料生 物活性有显著的影响，陶瓷晶粒尺度降低，未发现对成骨不利的生物学反应， 同时可使材料的生物活性明显提高：相同晶粒尺度的HA／TCP材料，其生物学 性能优于HA材料。 不同晶粒尺度的磷酸钙陶瓷体外成骨细胞培养实验发现：随着晶粒尺寸的 减小，磷酸钙陶瓷对ROSl7／28细胞增殖和分化能力显著提高。MTT实验表明： 具有纳米尺度晶粒的HA及HA／TCP陶瓷有利于细胞的贴附和增殖，该成骨细 胞在HA／TCP陶瓷表面的增殖比在HA陶瓷表面显著；成骨细胞碱性磷酸酶 Ⅱ 的磷酸钙陶瓷对于成骨细胞的分化可起到促进作用。SEM观察结果显示，晶粒 尺度从微米、亚微米直至纳米水平的磷酸钙陶瓷都可以支持成骨细胞在其表面 黏附生长。在纳米陶瓷样品上，细胞形态完整、伪足伸展明显、增殖活跃，细 胞显示出旺盛的生命代谢状态。 体夕l-N定小牛血清蛋白在微米及亚微米磷酸钙