马铃薯花粉原生体分离与培养.pdfVIP

!：查窒些查兰堡：!堡兰 堡堕型茎 ! 缩略词表 LiStofAbbreviations H|肃农业大学硕士论文 摘要 马铃薯花粉原生质体分离与培养 摘要 实验采用6个优良四倍体栽培种和3个双单倍体不同发育时期的花粉为供试材料， 研究花粉原生质体分离与培养的技术体系，取得如下结果： 1．对不同发育时期的花粉经低温和甘露醇处理后，进行培养，其中单核期幼嫩花粉 培养后脱分化频率达4．1％，具有孢予体发育的巨大潜力。四分体时期的花粉培养后不 能启动分裂；成熟花粉培养后易趋向于配子体发育方向。 蜗牛酶+o．5％崩溃酶+1．2％纤维素酶的混合酶液中，四分体原生质体分离率最高达 74．2％，在K3改良培养基+lmg／1 NAA+800 2，4一D+0．2mg／16-BA+1mg／1 mga谷氨酰胺 的原生质体启动第一次分裂，分裂频率最高达14．2％，培养10～15d后，无组织生长的 细胞最后增殖生成细胞团。 3岸核期幼嫩花粉先经饥饿处理，再经低温水合、高温热激、渗激多步冲击的方法 的酶液中，花粉原生质体最高分离率达24-3％，质体培养1～2d后再生细胞壁，3d后再 生细胞壁加厚，个别原生质体膨大后表现出孢子体发育迹象。 +0．02％Ca(N03)2+0．02％H3803+0．5mmol／1K+的培养基上马铃薯花粉萌发率最高达 83．4％，添加低浓度的Na+，6．BA能促进花粉萌发和花粉管伸长。 5．针对马铃薯成熟花粉的特点建立了“低温一萌发一酶解”的花粉原生质体分离方 液中，原生质体分离率达24．7％。 6．当花粉管长到约2～3mm后，转入酶液后1～2h就可观察到花粉粒发生质壁分离， 甘肃农业大学硕+论文 摘要 4～5h后花粉管亚原生质体被释放。花粉管亚原生质体大小差别较大，大的直径约 50～60rtm，小的约IO,Um，刚分离的亚原生质体易自发融合，培养1d后再生细胞壁。 关键词：马铃薯；花粉原生质体：脱外壁花粉；离体萌发； 型：塞垒些查兰堡圭篁兰 !!!!!!!! ! in andcultureof Solanum Isolation pollen protoplasts ABSTRACT Pollen a inthe of cell specialexperimentsystem studyplant protoplasts，as both of and canbeservedasan advantangeshaploidpmtoplasts，they engineering，have inSolanumtuberosum L．breeding impotrantsegment project．Thepresent factorsonisolationcultureof