siRNA干扰+E-cadherin表达对胃癌SGC7901细胞耐药性影响及其机制分析研究.pdfVIP

目录 中文摘要…………………………………………………………上．．．…………1 中文摘要 Si i RNA干扰E-cadhern表达对胃癌SGC7901细胞耐药性 影响及其机制研究 摘 要 目的：我国胃癌的患病率及死亡率均超过世界平均水平两倍。超过半 数以上胃癌患者在发现时已处于晚期，甚至失去手术机会，治疗多依靠化 疗等手段。目前胃癌化疗尚无金标准规范方案可循，且多年来疗效获益改 善有限。顺铂是各期胃癌化疗的基石药物，但单药或联合用药的有效率均 不超过20％，肿瘤原发或获得性耐药致使其疗效不佳或由有效转为无效。 胃癌对顺铂的耐药是一个多基因、多步骤和多因素的复杂过程。阐明胃癌 顺铂耐药的机制，提高其临床应用价值，改善患者预后及生存，是胃癌治 疗的重点。 to mesenchymal 袭转移等多种生物学行为的调节，其作为侵袭转移抑制因子已得到确认。 在内的多种细胞毒药物及靶向治疗的药物敏感性，但相关机制研究主要集 中于其对凋亡相关基因BCL．2表达的调节，且结论尚不统一。 在胃癌中的研究发现，E．cadhefin在胃癌组织中低表达或缺失，且 在胃癌的发生发展中可能发挥抑癌基因样的作用。但目前关于E．cadhefin 与胃癌顺铂耐药的关系研究尚未见报道。 为模型，二者具有相同的遗传学背景。我们发现E．cadherinmRNA及蛋白 在两株细胞间存在表达差异，其在SGC7901／DDP细胞中表达显著减低。 并对其相关机制进行初步探讨。为理解胃癌顺铂耐药机制进一步提供理论 基础，对于胃癌的治疗干预及新治疗靶点的发掘具有重要的科学意义。 中文摘要 感性的差异，应用RT-PCR、Western 2000转染试剂说明书将 siRNA及其阴性对照序列，按照Lipofectamine E．cadherin mRNA及蛋白的 48、72h后以ImPCR、Westernblot分别检测E．cadherin 表达情况，检测干扰效果。转染24h后细胞用于药敏研究，MTT法检测 细胞对顺铂的药物敏感性改变，转染72h后细胞提取细胞总蛋白，应用 Western blot检测细胞中BCL．2和BAX蛋白水平表达的改变。 结果： mg／L，敏感株为：2．206±0．256 性显著高于SGC7901细胞(P．o．05)。 2E．cadherinmRNA在SGC7901／DDP细胞中的相对表达量为：0．029 胞相比，E．cadherin mRNA及蛋白表达均显著减低愀0．05)。 3 siRNA SGC7901细胞转染E—cadherin24、48、72h后细胞中 E．cadherin 8 E．cadherin蛋白的相对表达量分别为：0．244±0．006、0．155±0．007和O．11 mRNA siRNA干 及蛋白表达水平较阴性对照组均显著减低(P0．05)。E．cadherin 扰序列可达到良好的沉默效果。 4SGC790 1细胞转染E—cadherin