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- 2016-02-01 发布于湖北
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TALENs的靶向基因修饰技术易懂版.创新.ppt
简介 Cas9 锌指核酸酶技术 (ZFN) 转基因技术 RNAi技术 生物应用模型构建 基因组靶向修饰 (TALENs) 普通的基 因敲除 什么是基因敲除? 是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物(表型),推测相应基因的功能。 基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术。 基因敲除的技术基础 基因敲除 胚胎干细胞(ES)分离 体外培养技术 1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中,基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。 基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。 交叉互换 基因敲除的技术基础 利用同源重组构建基因敲除动物模型的基本步骤 构建重组载体 表型研究 获得ES细胞 鉴定 筛选阳性细胞 同源重组 选择纯合子 TALEN基因敲除技术 TALEN( Transcription Activator-Like Effector Nucleases ) 转录激活子样效应因子核酸酶,, 科学家发现天然的TALENs最初是由黄单胞菌进入植物细胞分泌的,将它应用于基因修饰方面,使它成为了一种崭新的分子生物学方法. TALENs技术特点:1. 无基因序列、细胞、物种限制。
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