实验一兔血清免疫球蛋白分离与纯化.pptVIP

综合实验一 兔血清免疫球蛋白分离与纯化 主讲教师：申慧芳 岳续朋 生物工程教研室 蛋白质工程实验课 实验课要求 预习 不迟到、早退、不旷课、有事请假 穿白大褂、注意自我防护 不能喧哗，不做与实验无关的事 认真完成实验报告 值日要求：擦桌子、拖地、擦黑板、倒垃圾、关灯和门窗 一、实验目的 二、实验原理 三、实验仪器及试剂 四、实验步骤 五、注意事项 六、数据处理及计算 实验一 兔血清免疫球蛋白分离 一 、实验目的 学习并掌握盐析法的原理及用盐析法进行免疫球蛋白分离与纯化的技术。（IgG ） 抗体结构 抗体分子是由两条轻链(light chain, L链)和两条重链(heavy chain, H链)通过链间二硫键连接而成。 二、实验原理一 盐析 当用中性盐加入蛋白质溶液，中性盐对水分子的亲和力大于蛋白质，于是蛋白质分子周围的水化膜减弱甚至消失；同时，中性盐加入蛋白质溶液后，由于离子强度发生改变，蛋白质表面电荷大量被中和，更加导致蛋白质溶解度降低，使蛋白质分子之间聚集而沉淀，这个过程叫做盐析。 实验原理-盐析 不同蛋白质由于所带电荷不同以及水化程度不同，加入不同浓度的中性盐可分阶段从溶液中沉淀出来。 蛋白质盐析中最常用的盐是硫酸铵 硫酸铵分级沉淀 三、 实验仪器