植物组织培养基本方法.ppt

植物组织培养的基本方法 目的要求 1．一般掌握灭菌和消毒的区别　 2．掌握灭菌的方法和具体操作过程 3．掌握无菌接种的步骤 　 4．掌握外植体的选择、培养方法和步骤 5．一般掌握外植体褐变和玻璃化的处理方法 6．掌握试管苗驯化的基本程序 7．一般掌握快速繁殖试管苗的计划安排及增殖倍数计算方法 灭菌 灭菌是组织培养重要的工作之一。初学者首先要清楚有菌和无菌的范畴。 这里所指的菌，包括细菌、真菌、放线菌、藻类及其它微生物。 灭菌是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。 消毒，它指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用，显然经过消毒，许多细菌芽孢、霉菌的厚垣孢子等不会完全杀死，即消毒后的环境里、物品上还有活着的微生物。 而通过严格灭菌的操作空间（接种室、超净台、等）和使用的器皿，以及操作者的衣着和手都不带任何活着的微生物。在这样的条件下进行操作，就叫做无菌操作。 常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类。 物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施。 化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。 这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。 1．培养基用湿热灭菌