瑞氏木霉碳源阻遏相关基因Cre1的分子改造.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2014年，第 33卷，第 2期，第 288—292页 GenomicsandAppliedBiology，2014，Vo1．33，No．2，288—292 研究报告 ResearchReport 瑞氏木霉碳源阻遏相关基因Cre1的分子改造 陈小玲 陈东 张穗生 陈英 广西科学院非粮生物质酶解 国家重点实验室，国家非粮生物质能源工程技术研究中心，广西生物质炼制重点实验室，南宁，530007 通讯作者，xiaolingchenl116@163．corn 摘 要 为了提高瑞氏木霉(Trichodermareesei)纤维素酶的活力，用类似基因改组的方法改造其碳源阻遏相 关基因crel。以瑞 氏木霉基因组 DNA为模板 PCR扩增 crel基因，用 DNaseI消化 creJ基因后，回收 50～100bp的DNA片段，用 T4DNA连接酶连接，以连接产物作为模板进行无引物 PCR，并将 PCR产物转 入瑞 氏木霉原生质体，通过测定滤纸酶活的方法筛选突变菌株，并在NCBI上比对分析突变菌株的crel基 因。结果表 明，筛选获得 1株纤维素滤纸酶活 比出发菌株提高 0．7倍的突变菌株 cre cre一菌株在液体培养 基 中呈棉花状，而出发菌株呈小颗粒状，菌株 cre 发酵液的颜色 比出发菌株的更黄亮。推测 creJ基因与瑞 氏木霉菌株