分子生物学常用技术WXK-凝胶电泳技术杂交技术-..pptVIP

分子生物学常用技术 3.1 凝胶电泳技术 3.2 分子杂交技术 3.3 PCR技术 3.4 生物芯片 3.5 基因文库构建 3.6 DNA测序 3.1 凝胶电泳技术 凝胶电泳(Gel electrophoresis)是分子克隆的中心技术之一。 1. 琼脂糖凝胶用于分离200~1000bp的片段； 操作简单、快速，且分离范围广，分辨率高 2. 聚丙烯酰胺凝胶用于分离5~500bp的片段； 效果好、分辨率极高，相差1bp的DNA片断就能分开，能容纳相对大量的DNA 用于DNA测序；核苷酸多态性的分析 3.1 凝胶电泳技术 3.1.1 琼脂糖凝胶电泳的原理 琼脂糖 Agarose 主要从海洋植物琼脂中提取来的，为一种聚合线性多糖分子。琼脂糖溶液冷却形成的琼脂糖凝胶 Agarose gel呈网状结构，具有分子筛效用，可作为DNA电泳介质。琼脂糖凝胶的孔径取决于琼脂糖的浓度。 经化学修饰后熔点降低的琼脂糖叫低熔点琼脂糖 Low melting point agarose ，其机械强度无明显变化，但可被agarase水解。主要用于胶中DNA的直接酶促反应