分子筛色谱..pptVIP

高效液相色谱法分类(按分离机制) 液固吸附色谱法 (LSAC) 液液分配色谱法（LLPC) 离子交换色谱法 (IEC) 离子对色谱法 (IPC) 分子排阻色谱法(SEC) :又叫做凝胶色谱法,分子筛色谱法,尺寸排阻色谱法. 应用 广泛应用于大分子的分级，即用来分析大分子物质相对分子质量的分布。 二 :分离原理:(存在几种) 立体排斥理论 有限扩散理论 流动分离理论 分子热力学理论和二次排斥理论等 由于用立体排斥理论解释凝胶色谱中各种分离现象与事实一致,因此被广泛采用。 立体排斥理论 分离基础主要依据溶液中分子体积大小进行分离 不同尺寸的高聚物分子分离示意图: 流路系统 常用的流动相 四氢呋喃、甲苯、N，N’-二甲基甲酸胺、三氯甲烷（凝胶渗透色谱）；水（凝胶过滤色谱）等。 水为流动相: 适用于水溶性样品，有机溶剂流动相: 适用于非水溶性样品。 例子二:GFC法测定芪参多糖的分子量分布 色谱条件和试剂: 色谱柱：Polysep-GFC –P 4000 (300×7.80mm, Phenomenex ) 流动相：纯化水 PL-ELS 2100蒸发光散射检测器 色谱工作站：英谱 HS色谱数据工作站（带GPC软件） 标准分子量多糖(麦芽糖) :Shodex Standard P-82 系列(昭和电工 ) HPGPC标准分子量拟合曲线(二级