发光法检测食品微生物..pptVIP

发光法检测食品中微生物 讲解人：赵亚丽 发光生物 真菌、甲虫、蠕虫、海星，等等，还有我们最熟悉的萤火虫 海洋中有好几千种发光生物。深夜，在海中游泳或岸边漫步时，都会看到海上的“磷光”现象。 一、生物发光 ATP 法微生物检测 ATP理化性质 ATP(adenosine triphosphate， 三磷酸腺苷) 是高能磷酸化合物的典型代表。ATP 是由一分子腺嘌呤、一分子核糖和三个相连的磷酸基团构成的核苷酸，其分子结构式如图 1 所示。ATP是细胞内特殊的自由能载体，广泛地存在于细胞内，如细胞核、细胞溶胶、线粒体等。易水解，且水解时可释放出大量的能量，但水解易受细胞内环境的 pH 、Mg2+浓度等的影响。ATP 在生命活动中起着传递能量的作用。 二、ATP 生物发光法检测的原理 ATP 普遍存在于所有活的生物体中，被用来贮存和传递化学能，称作为“能量货币”。当生物体死亡后，在细胞内酶的作用下，ATP 很快被分解掉。因此，测定样品中的 ATP 浓度，即可推算出活菌数。 McElroy最先引入“荧光素酶---ATP” 检测法，其反应机理为：在Mg2+存在下， 荧光素酶(firefly luciferase)以 D-荧光素酶、ATP 、O 2 为底物，将化学能转化为光能。在荧光素酶催化的发光反应中，ATP在一定的浓度范围内，其浓度与发光强度呈线性关系。 三