细菌和噬菌体的遗传重组..ppt

第六章 细菌和噬菌体的遗传重组 Inheritance in Bacteria and bacteriophages 迄今为止，我们所讨论的均是有减数分裂的真核生物的遗传特点，而没有核、不进行减数分裂的原核生物（细菌、病毒等）的遗传物质又是如何传递的呢？ 细菌的细胞和基因组 细胞结构-----与真核细胞的差异：缺乏线粒体、叶绿体，无核膜。 细菌和病毒的拟有性过程 真核生物基因分离、自由组合及连锁交换均通过有性过程(减数分裂——受精)实现。细菌和病毒均属于原核生物，不存在严格意义上的有性过程。 细菌细胞内除了染色体外还有一些寄生性复制因子（如噬菌体和质粒），又称核外或染色体外因子，可以在细胞间传递，并形成细菌染色体间以及细菌染色体与核外遗传因子间的重组体。 拟有性过程——引起细菌、病毒间遗传物质转移与重组的过程。 细菌的细胞分裂 E. coli 基因组： E.coli 4.6 Mb，4288 genes 90% 编码蛋白质 细菌的突变型及其筛选 （一）营养缺陷型 在营养代谢上是有缺陷的菌株，统称为营养缺陷型，而把正常的野生型叫做原养型。 基本培养基：能满足野生型菌株营养要求的最低成分的组合培养基。 补充培养基：在基本培养基中有针对性地加上某一种或几种其自身不能合成的成分，以满足相应营养缺陷型生长的培养基。 完全培养基：在基本培养基中加入一些富含生长因子的物质，以满足该微生物各种营养缺陷型要求。 1、合成代谢缺陷型 ： 不能合成细菌生长所需要的物质。 (1) 鉴别： (2) 基因型和表型的表示 用它们不能合成的物质的前三个字母来表示。 2、分解代谢缺陷型 不能降解某些复杂的化合物。如：不能分解乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、木糖、麦芽糖。 (1) 鉴别：使用鉴别培养基 如乳糖分解缺陷型， 用EMB培养基（加伊红和美蓝）鉴别，原养型菌落是紫红色菌落，缺陷型为粉红色菌落。 (2) 基因型和表型的表示： lac- /Lac-乳糖不能利用；gal- / Gal-半乳糖不能利用。 由于基因突变而对某些噬菌体或抗菌素产生抗性。 (1) 筛选：使用选择培养基 在培养基中加入抗性物质。 (2) 基因型和表型的表示： 噬菌体名或抗菌素名符号+r或s：r---抗性 s---敏感 strs / Strs , tons / Tons strr / Strr , tonr / Tonr 病毒的一般特性 无细胞结构----为蛋白质外壳包裹核而成的颗粒 形体极微小----电子显微镜下观察 化学组成简单----核酸（DNA或RNA）和蛋白质 缺乏独立代谢能力----依赖宿主（但宿主范围比较窄） 繁殖方式独特----依赖宿主活细胞的代谢机制，通过核酸复制和蛋白质合成后再装配成完整的病毒颗粒 具有双重存在方式----或专性寄生在活细胞内，或在细胞外以大分子颗粒状态进行传播 对干扰素敏感，而对抗生素不敏感 细菌和病毒在遗传研究中的优越性 世代周期短----大肠杆菌（Escherichia coli）20分钟即可繁殖一代 易于管理和进行化学分析----用一支试管就可贮存数以百万计的细菌或病毒，在短期内累积大量产物，为化学分析提供条件。 遗传物质较简单----只有一个裸露的DNA或RNA分子 便于研究基因的突变----裸露的DNA分子（有的噬菌体为RNA分子），容易受环境条件的影响而发生突变；单倍体生物，不存在显性掩盖隐性问题，隐性突变也能表现出来。 便于研究基因的作用----细菌可以生活在基本培养基上，易于获得营养缺陷型，也易于测知各种营养缺陷型所需要的物质，可以从生化角度研究基因的作用。 可作为研究高等生物的简单模型----可以从微生物的研究中得到模型，并从中获得启发，为开展对高等生物的的遗传研究开拓思路。 细菌基因重组的方式 一个细菌细胞的DNA与另一个细菌细胞DNA的交换重组可以通过四种不同的方式进行： 转化 接合 性导 转导 转化（transformation） 转化------是指某些细菌（或其他生物）能通过其细胞膜摄取周围供体（donor）的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。 转化中，提供遗传物质的细胞称为供体（donor），接受供体遗传物质的称为受体（receptor）。 只有当整合的DNA片段产生新的表现型时，才能测知转化的发生。 一、转化的发现 转化的两个实验在下一章介绍。 转化过程 不同细菌转化过程有一定差异，但是它们都存在几个共同特征： 1. 供体DNA与受体细胞结合——吸附 2. DNA的穿入和摄取——吸收 3. 联会与外源DNA片段整合 转化过程 转化子：细菌细胞经过转化所形成