Src激酶抑制剂PP2对乳腺癌MDA-MB-231细胞黏附、迁移能力的影响.pdfVIP

维普资讯 南京医科大学学报(自然科学版) 第 28卷第 7期 · 850 · ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING(NaturalScience) 2008年 7月 Src激酶抑制剂PP2对乳腺癌MDA．MB．231细胞黏附、迁移能力的影响 杜 军，戈应滨，顾 洛 (南京医科大学生理学系，江苏 南京 210029) [摘 要] 目的：研究 Src激酶抑制剂PP2对人乳腺癌细胞 (MDA—MB231)肌动蛋白细胞骨架及黏附、迁移能力的影响。方法： 不同浓度src激酶抑制剂PP2(O．2、1．0、5．0和25．0Ixmol／L)孵育MDA—MB一231细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记 F～肌动 蛋白，用荧光显微镜分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况；用免疫印迹技术检测细胞内骨架组分 (Triton不溶组分)及胞浆组分 (Triton可溶组分)中肌动蛋白的分布；划痕损伤实验检测细胞迁移速度；四甲基偶氮唑盐比色法(MTr)检测细胞对人工重组基 底膜 (Matrige1)的黏附能力。结果：PP2处理可导致细胞内肌动蛋白细胞骨架发生解聚，F一肌动蛋白排列和分布及细胞形态发 生明显改变 ；此外 ，PP2可明显降低MDA—MB一231细胞迁移速度及其对人工重组基底膜的黏附能力，其效应呈剂量依赖性。 结论：Src激酶抑制剂PP2可影响乳腺癌细胞的黏附及迁移能力，其作用可能与其对肌动蛋白细胞骨架的重组有关。 [关键词] Src；细胞骨架；黏附；迁移；PP2；乳腺癌细胞 (MDA—MB一231细胞) [中图分类号] Q555．7 [文献标识码] A [文章编号] 1007—4368(2008)07—850—05 EffectsofSrcinhibitorPP2ontheadhesionandmigrationofhumanbreastcancercells (MDA-MB-231) DUJun，GEYing-bin，GU Luo (DepartmentofPhysiology，NJMU，Nanjing210029，China) [Abstract] Objective：ToinvestigatetheeffectsofSrcsignalpathwayontheadhesionandmigrationinhumanbreastcancercells (MDA-MB一231)anditsroleinthereorganizationofactincytoskeleton．Methods：TheMDAMB一231cellsweretreatedwithSrcinhibitor PP2invariousconcentrations(0．2，1．0，5．0and25p~mol／L)for24h．MrI、assaywasusedtodetecttheadhesiveabilityofMDA—MB一 231cellstoartificialbasementmembrane．Mirgationratewasmeasuredbywoundhealingassay．Todetectthereorganizationofactin cytoskeleton，thecontentsofG—actin (incytosolicfraction)andF—actin (incytoskeletalfraction)incellswereevaluatedbyWestern blot，andthedistributionofF—actinstainedbyFITC—phalloidinincellswasalsoexaminedbyfluorescencemicroscopy．Results：After treatedwithPP2 f0r24h．theabilityofadhesionand migration in MDA—MB一231cellsweresignificantlyreducedcomparedtothe controlcellsinadose—dependentmanner．Consistently，thecelluarF—actinwasals