两种型特异性引物聚合酶链反应法检测乙型肝炎病毒基因型及.docVIP

两种型特异性引物聚合酶链反应乙型肝炎病毒基因型的评价 金晖 王杰 闫玲 李卓 聂晶晶 李杰 庄辉【摘要】 目的 比较并评价本研究室和日本NaitoNaito法）等建立的乙型肝炎病毒（HBV）型特异性引物聚合酶链反应（PCR）基因分型法。 材料和方法 分别Naito法检测系列稀释含有A、D基因型和B、C2亚型HBV基因组的质粒评价两种方法的灵敏度和特异度。用两种方法分别对深圳市、河北邯郸市、新疆乌鲁木齐市送检的11份HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者的血清标本进行HBV基因分型，对两种分型方法检测结果不一致的血清样本用PCR产物直接测序法验证。结果 用含有HBV基因组的质粒结果显示特异度明显优于Naito法。两种方法检测单一基因型血清本的灵敏度无差异，对HBV DNA浓度为102～109 拷贝/ml血清标本的检出率均为100%，并可检测出≤5×102 拷贝/ml的血清标本。但方法对B/C混合型样本的检出率更高。两种方法检测结果的总符合率为%（/113），不一致率为%（113）。从份两法分型不一致的血清标本中，随机份PCR产物直接测序，与方法结果完全一致。结论 本室建立的HBV型特异性-PCR基因分型法具有较高灵敏度，且特异度明显优于目前临床上常用的Naito等建立的方法，适用于大规模的临床样本检测及流行病学调查，对我国HBV基因型及基因亚型研究提供了新的有力的手段。 两种型特异性