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Gen5 software 中文簡易操作手冊 點選桌面上 Gen5 icon，進入軟體。 點選 Experiment，開新實驗。 選擇 Default Protocol，按OK。 主畫面介紹： Protocol 設定 包含讀盤步驟設定（Procedure）、盤格設定（Plate Layout）、資料處理（Data Reduction）、資料輸出設定（Power Export Builder）…等。 讀盤步驟設定（Procedure） 在視窗左方的Procedure點二下。 依實驗需求點選Procedure視窗左方的步驟，每點入一個步驟就進入設定。讀盤時會依步驟排列的順序執行。 Read:選擇讀盤方式、波長、讀盤範圍… Dispense：輸入Dispense Volume、選擇要注reagent的plate範圍 Shake：選擇震盪幅度（Intensity）、震盪時間（Duration） Delay：輸入延遲時間 Kinetic：輸入讀取總時間（Run Time）、每次讀取間隔時間（Interval） Monitor Well:監測well讀值逹到設定值時，再執行下一步驟 Set Temperature：溫控設定 Plate Out/In：吐盤/收盤 Stop/Resume：停止 ** Synchronized Modes** Plate Mode：整盤執行完一步驟後才換下一步驟。與一般讀取方式的差異在於可平均分配每一步驟所需的時間至每個well（例如讀一個96-well plate需32秒，則平均分配時間使每個well讀0.33..秒）。此模式適用於對時間要求很嚴格的實驗。 Well Mode：若需要在一個well做完所有步驟（ex.加reagent、shake、讀值）再換下一個well時，則選用此模式。 盤格設定（Plate Layout） 在Plate Layout點兩下，設定各項如下： Standard 濃度設定: Sample 稀釋倍數設定: 資料處理（Data Reduction） 在Data Reduciton點兩下，選擇需要的資料處理項目：Transformation、Well Analysis、Curve Analysis、Cutoff、Validation…等 Transformation:寫公式進行資料計算 Curve Analysis：標準曲線設定 Cutoff：設定判定方式或判定值，對實驗結果加以判別分類 資料輸出設定（Power Export Builder） 在Power Export Builder點兩下，進入Excel畫面。 在Excel畫面中可看到Field Group、Matrix、Table、Curve選項：Field Group可設定單一Matrix或Table中要呈現的資料項目，Matrix中的結果會以96孔盤型式呈現，Table的結果則以報表呈現，Graph則可插入標準曲線圖。選擇需要的結果及呈現方式，存檔。 讀盤及資料輸出 點選要讀取的Plate，按下Read Plate圖示，讀盤。 切換頁面及利用下拉式選單可看結果。 按下Power Export圖示則可將結果輸出到Excel，或可利用快速輸出鍵，將目前畫面看到的結果輸出到Excel。 開啟舊檔及讀新盤 開啓舊檔 在Gen5 畫面點選Open a Recent Item項目下的More，選擇檔案。 或 (2)在File項目下選擇Open Experiment。 在現有的protocol下讀新盤 開啟舊檔後，將游標移到Plate1處，按右鍵，選擇Add Plate。輸入要增加的Plate數目。 點選Plate2兩下，開啟Plate2，即可讀盤。 備註 機器的判讀可由軟體決定由上或由下 一般而言 細胞貼附於培養盤底部，需要下方判讀，故此時需要黑盤或白盤透明底 已經打破的細胞，懸浮液體，建議一般白盤或黑盤即可 特例：螢光訊號很強的貼附型細胞可試由上方判讀 實驗及結果視窗。點選畫面左方任何Protocol 設定項目，都會顯示在畫面右方；或點選Plate，則可讀盤或察看讀過的Plate的結果。 Plate的資訊。一個protocol可能有很多讀盤資料，每個plate的資料會呈現在此。 Protocol設定，包括實驗步驟、盤格設定、資料處理、輸出設定..等。 選擇所需的實驗步驟，並進入設定。 在此例中，讀盤時會先注入15ul reagent，然後 shaking 1秒，再讀取O.D. 260。 選擇Absorbance（吸光）、Fluorescence（螢光）、Luminescence（冷光） 選擇讀盤速度：Normal、Rapid、Sweep 選擇波長