平面和三维培养对兔髓核细胞增殖和基质合成影响的实验研究.pdfVIP

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2016-02-12 发布于北京
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平面和三维培养对兔髓核细胞增殖和基质合成影响的实验研究.pdf

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维普资讯 · 178 · 东JSo南uth大eas学tUnn学livv(Me(dsciE篓di12008，’M～a一y；’27(3)：。1…78．…183，’封—三— Optimizingthepreparationconditionofagarose-basedantibodymicroarray ZHUYing ，L0Lin--li-，LUZu-hong ，LIUBi．cheng (1．InstituteofNephrology，ZhongdaHospital，SoutheastUniversity，Nanjing210009，China； 2．StateKeyLaboratryofBioelectronics，SoutheastUniversity，Nanjing210009，China) Abstract：Objectve Totesthtefeasibilityofenhancingtheassaysensitivityofantibodymicroarraybasedonagar- Oes film throughoptimizingsomebasicexperimentalconditions．MethodsModifiedglassslideswereroboticallyprinted tlIcaptureantibodiesagainstmonocytechemoattractantprotein1(MCP。1)。thendilutionsofthecytokinewereapplied tothearraysandhteproteinWaSdetectedwithbiotin-labeledantibodycoupledwithCy3-conjugatedstreptavidin．AlaSer confocal scnanerWaS usedtoobtaintheimagesandthesignalintensitywasanalyzedsubsequently．A seriesoffactorsin hteproductionofantibodymicroarrayswereanalyzed：theimmobilization temperatureandtimeofcaptureantibodynad waShingbuffers．Results Thesystem showedthehighestsignal intensitywhenthecaptureantibodywasimmobilizedO- vemightunderroomtemperature(about25oC)comparedwithimmobilizationovemi~tunder4oCand37oC．Phos- phate-bufferedsalinecontainingTween20(pH7．4)wasdemonstratedtobeamuchmore~vorablewashingbufferfor htissystemcomparedwihttris—bufferedsalinecontainingTween20(pH7．4)．Conclusion Theoptimizedconditions havebeenestablishedtoenhancehtesignal intensityofantibodymicroarrayonhteagarosefilm coatedglassslide． Keywords：antibodymicroarrays；agarose；glaSsslide；sensitivity；washingbuffer；incubationtime；incubation temperature 平面和三维培养对兔髓核细胞增殖和基质合成影响的实验研究朱磊，吴小涛，董寅生，王运涛，邱匀峰，张福勇，鲍军平 (东南大学附属中大医院骨科，江苏南京 210009) [摘要]目的：探讨兔髓核细胞平面和三维培养对其增殖及基质合成的影响，为椎问盘组织工程寻找一种新的种子细胞获取方法。方法：体外培养兔髓核细胞，分为平面培养组和PLGA支架三