噬菌体展示技术及应用.pptVIP

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宝山壁画 宝山壁画是引人注目的昂贵文物。此壁画发现于阿鲁科尔沁旗东沙布乡境内。1994年列为“全国十大考古新发现”之一。宝山壁画中最引人注目的是《杨贵妃教鹦鹉图》。该画高0.7米、宽2.3米,用于笔重彩绘制,最突出的表现了 晚唐风格。唐代擅长绘贵妇仕女的大师周昉绘制了《杨贵妃教鹦鹉图》,不仅享誉中原,而且还影响全国各地。发现于阿旗宝山古墓里的这幅画,就是契丹人聘请中原画家按照周氏风格绘制的, 技法深得周氏画风的真传。在唐人真迹稀如星风的今天,能够从中完整了解唐代人物画的杰出成就,堪称美术史研究的辛事。这幅壁画现今保存在阿鲁科尔沁旗博物馆,历经千年,恍如新绘,是该馆的镇馆之宝。 欢迎大家观看! Phages for targeted gene-delivery Phages have also been proposed as potential therapeutic gene delivery vectors . Although conceptually different, the rationale for using phages for this purpose is similar to that for using phages for DNA vaccine delivery – the phage coat protects the DNA from degradation after injection, and the ability to display foreign molecules on the phage coat also enables targeting of specific cell types, a prerequisite for effective gene therapy. 细菌的鉴定与分型    噬菌体与宿主菌的关系具有高度特异性,即一种噬菌体只能裂解一种和它相应的细菌,故可用于未知细菌的鉴定和分型。例如用伤寒沙门菌Vi噬菌体可将有Vi抗原的伤寒沙门菌分为96个噬菌体型。这对流行病学调查、追查传染源等具有重要意义。 * 噬菌体展示技术及其应用 高 建 明 噬菌体是细菌病毒, 在与宿主细胞特异性受体结合并注入其DNA 后, 能将其DNA 整合进宿主基因组(溶原性) , 或用于合成新的噬菌体颗粒。在真核宿主中, 噬菌体不能复制, 如无合适的原核宿主, 噬菌体如同无生命的颗粒性抗原。 噬菌体可以是单股DNA (如M 13、fd 和f1)、双股DNA (如λ 噬菌体)、双股RNA (如f6) 或单股RNA (如M S2 和Q B)。噬菌体在自然环境中普遍存在, 数量和种类远多于细菌。 噬菌体展示技术(Phage Display techniques,PDT)起源于1985年,是一种用于筛选和改造功能性多肽、蛋白质强有力的生物技术,广泛应用于蛋白组学、基因克隆等多个分子生物学领域。 目前噬菌体展示技术的研究进展非常迅速,在抗原决定簇的定位、蛋白质相互作用位点的确定、特异调节分子的分离和人工抗体和疫苗的制备、诊断技术、酶抑制剂的研究开发、多肽药物的研制等生物技术研究的不同领域得到了应用,并对这些领域产生了深远的影响。 噬菌体展示的基本原理 在噬菌体衣壳蛋白基因中插入外源基因,形成融合蛋白表达在噬菌体颗粒蛋白的表面,被展示的多肽或蛋白质可保持相对独立的空间结构和生物学活性。 利用靶分子,采用适当的淘洗方法(亲和→洗脱→扩增→亲和的循环步骤),洗去非特异结合的噬菌体,最终从噬菌体文库中筛选出能结合靶分子的目的噬菌体;外源多肽或蛋白质表达在噬菌体的表面,而其编码基因作为病毒基因组中的一部分可通过噬菌体DNA 序列测序出来,使得表达蛋白(表现型)和编码基因(基因型)之间完美地结合起来,为生物科学提供高效而实用的研究手段。 Smith GP. Filamentous fusion phage : novel expression vectors that display cloned antigens on the virion surface . Science ,1985 ,228 :1315 - 1317. 1985年Smith首次通过基因工程的手段,将外源基因插入丝状噬菌体基因组中,从而使表达的外源肽或蛋白与噬菌体外壳蛋白一起展示在噬菌体表面,由此建立了噬菌体展示技术。 1990年Scott等首次将随机序列肽与丝状噬菌体表面蛋白g 融合展示在噬菌体表面,建立了噬菌体展示随机肽库。 Scott J K, Smit h GP. Searching fo

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