人工合成小麦群的微卫星分子标记研究.pdfVIP

人工合成小麦群体的微卫星分子标记研究 博士生：陈其皎 指导教师：刘登才研究员 专 业：作物遗传育种 捅 要 在自然界，由不同物种杂交后经染色体组加倍产生的异源多倍体植物非常普遍。 aestivum 普通小麦(Triticum tauschii)为父 种的一个典型代表，它是由栽培四倍体小麦为母本与节节麦(Aegilops 本天然杂交，然后通过染色体自然加倍形成的新兴异源六倍体物种。模拟小麦起源过 程可以合成新六倍体小麦(人工合成小麦)。近年围绕人工合成小麦进行的相关研究， 已为异源多倍化起源机制探讨和异源多倍体作物种质资源开发及遗传育种研究提供 了十分重要的参考信息。本研究以新合成的人工小麦群体为材料，对微卫星(SSR) 产物进行了详细的比较研究，主要研究结果如下： 利用四倍体硬粒小麦(7=turgidum 远缘杂交，不使用幼胚培养处理获得的4个Fl杂种自交分别自发产生了20，19，23， 有105对引物得到可以辨别的扩增产物。其中，55引物对来自普通小麦或节节麦的 D．基因组，46对分别来自普通小麦的A或B基因组，1对来自普通小麦的A／B／D基 因组，l对来自普通小麦的A／D基因组，2对来自普通小麦的B／D基因组。在55对 D．基因组引物中，18对从LDN扩增出SSR产物，表现出可转移性或非D基因组特 AS60 低于前者； 包括2对引物在四倍体小麦LDN的SSR片段在合成小麦中丢失，2对引物在合成小 对引物在合成小麦中产生新片段，l对引物在合成F2群体中的一些植株带纹变小。D 基因组SSR的变异高于A／B基因组的SSR变异。此外，l对A／D基因组引物从彳8． 起SSR变异，这样的变异可能导致新六倍体小麦群体的SSR遗传多样性增加。但是 从本研究结果看，杂交世代和加倍世代引起SSR变异的频率并不高。相反，现存普 通小麦存在非常高的SSR遗传多样性。根据本研究结果，讨论了现存普通小麦大量 SSR遗传变异的产生等问题。 产物进行的比较，未观察到SSR大小上的差异、新带出现或亲本带纹丢失等变异。 我们对其中的4对SSR引物的扩增产物进行测序，却发现有2对引物在Fl代的部分 植株发生了碱基突变，而且该突变传递到其F2代植株。这表明，细胞质基因组在合 成小麦后代出现了变异。 因为人工合成六倍体小麦与栽培普通小麦之间存在高的多态性，所以人工合成六 倍体小麦已被广泛用于遗传研究分离群体的构建。许多从普通小麦开发的特异SSR 分子标记可以从供体四倍体小麦和节节麦及它们的人工合成小麦中扩增出SSR产物， 表现出可转移性，这暗示对普通小麦来说是单一位点的SSR产物，在人工合成六倍 体小麦可能在两个或两个以上位点存在SSR产物，表现出非特异性。在用人工合成 小麦群体和SSR进行遗传分析时，这是一个容易被忽略的重要问题。但是，目前还 缺乏更为有效的遗传学证据证明这种“非特异性”。本研究利用SSR标记GWM261作 为一个例子，详细探讨了该问题。GWM261在普通小麦中国春扩增出了一个192 bp 片段，该片段只存在于中国春的2D染色体上。该标记在具有D基因组的节节麦AS60 上扩增出了一个176 bp片段。但是，染色体定位和DNA测序表明一个完全相同的 176 bp片段也存在于四倍体硬粒小麦Langdon 成的人工小麦Syn．SAU．5也出现176bp片段。推测Syn—SAU-5的176bp片段包含两 2B染色体上， 个不同的位点，其中一个来自AS60的2D染色体，另一个来自Langdon 85个F2分离群体得到证实。根据上 这一推测通过Syn．SAU．5和中国春杂交