人工合成甘蓝型籽油菜的分子标记和利用研究.pdf

摘要 油菜是我国主要的油料作物，其中甘蓝型油菜种植最为广泛。甘蓝型油菜 的一个重要育种目标是提高单位面积上的产油量，而产油量是由油菜籽产量 和种籽含油量决定。目前提高产量潜力，增加种籽产量的主要方法是利用杂 种优势，选育杂交组合，在我国，应用最广的杂交系统是波里马不育胞质。 提高含油量育种主要从两个方面入手：一是提高种胚含油量，一是减少种子 皮壳率。在相同遗传背景下，黄籽油菜与黑籽相比：含油量和蛋白质含量高， 种皮薄，油质清澈透明，饼粕纤维素含量低。将黄籽性状导入到波里马恢复 系中，选育杂交种，将是一种提高产油量的理想途径。 人工合成甘蓝型黄籽品系No．2127．17，黄籽性状稳定，颜色纯黄，本研究 对其黄籽性状的遗传和分子标记进行研究，应用MAS方法将No．2127．17的 黄籽基因回交转到波里马恢复系恢5148．2中，培育优良黄籽恢复系，为选育 黄籽杂交种提供亲本，研究结果如下： 大田甘蓝型油菜小孢子培养的最佳取样时间是上午7时，出胚率达4．31 枚／蕾。接种最佳花期是单株第一朵花开后6。20天的两周时间，接种出胚率为 够获得76．47％最高加倍效率。 的DH群体遗传分析表明，No．2127．17的种皮颜色受母体植株基因型控制， 黄籽对黑籽为部分显性，一对基因控制。 表明，2个RAPD和8个AFLP标记与黄籽基因紧密连锁，在构成基因池的 x No．2127-17)上连锁分析表明，10个标记在同一连锁群上(53．8cM)，其中2 cM、a 与黄籽基因距离最近且相引连锁和2个相斥连锁且分子量最大的AFLP标记 进行回收、克隆、测序，设计20bp-25bp特异引物，进行SCAR标记转化。 物的PCR产物进行4碱基限制性内切酶酶切，酶切结果显示，EA05MCl2／ Bshl236I能揭示多态性，发展成共显性CAPS标记(SCAl)。两个标记的遗 传距离分别为3．2cM和3．8eM。在一个回交群体中，对这两介标记评价表明， 它们更加稳定、快捷，适合于大规模黄籽基因跟踪，进行分子标记辅助选择。 MAS与传统表型选择和品质分析相结合，应用杂交一回交一自交的方法， 将No．2127．17的黄籽基因导入到恢5148．2中。根据自交和杂交当代种子的品 质分析结果，结合各个组合的田间表现，选择一个组合进行MAS分析。BClFl 半非目标单株。每代对中选阳性单株采用两步法进行背景选择，BC】Fl共用 每代中选3个单株与恢5148—2回交，同时套袋自交。BC2F2用共显性标汜SCAl 进行单株选择，共选到7株低芥、中硫、纯合基因型的黄籽恢复系。 关键词：甘蓝型油菜；种皮颜色；遗传分析；黄籽基因：分子标记；分子 标记辅助选择 7 Abstract oilseed isthemost is ofthe napus one major crops，Brassica Rapeseed theworld．A inthe ofBrassicaisto in objectivebreeding napus important primary isdeterminedtheseed oil unitareawhich increasethe per by yieldpotential yield seeds．Acommontoenhancethe isto andoilcontentinthe strategy yieldpotential varieties the