中药复方透皮贴有效成分的提取及测定方法研究.pdfVIP

Anhui Agricultural University Master Dissertation Study on Extraction and Determination Methods of the Active Ingredients from Chinese Herbal Drugs Compound Transdermal Patch Graduate student: WANG Yang Advisor: Prof. WU Jinjie Cooperative Advisor: Dr. WANG Xichun Academic Degree applied for: Master of Agricultural Science Major: Clinical Veterinary Science Research Direction: Veterinary Clinical Diagnosis and Treatment Technology Institute: College of Animal Science and Technology Answer Committee Chairman: June 20 13 摘 要 中药复方透皮贴剂（专利号：ZL 201010132973.2 ）为治疗奶牛乳房炎的纯中药 制剂，含有黄连、马兰、木芙蓉、黄芩、紫花地丁等成分，具有抗菌消炎、清热解毒、 行气活血散瘀，促进乳房血循环的功效。其组方中黄连的主要成分为盐酸小蘗碱，黄 芩的主要成分为黄芩苷，木芙蓉中含有芦丁。有资料报道，马兰、紫花地丁也均含有 黄酮类成分。为了确定该复方中有效成分的含量，本文建立了同时测定其中 3 种不同 主要有效成分盐酸小蘗碱、黄芩苷、芦丁的方法，为制订该中药制剂的质量标准提供 依据。 该中药制剂有效成分的实验室提取方法为索氏提取法，耗时长且操作步骤多。为 了适应进一步扩大生产的需要，本研究采用正交试验法优选最优超声波提取方法，以 层次分析法对选取的盐酸小蘗碱含量、芦丁含量、黄芩苷含量和峰面积总值 4 项评价 指标进行综合分析。同时将最优提取方法与传统提取方法进行对比。 试验结果如下： 1. 同时测定其中3 种有效成分的 HPLC 方法 通过不同色谱条件对比，研究确定高效液相色谱方法为：Phenomenex C18 柱（4.6 mm× 150 mm, 5 μm) ，柱温 30 ℃，流动相为乙腈（B ）-1%冰醋酸水溶液(C)，梯度 -1 洗脱(0→25 min ，B 20%→40% ；25 min→30 min ，B 40%→20%) ，流速 1.0 mL·min ， 检测波长 265 nm 。 在该方法下标准品和供试品均能得到有效分离，可满足同时测 定盐酸小蘗碱、芦丁、黄芩苷 3 种有效成分含量测定的要求。 2. 优化后的超声波提取方法 采用正交试验法，对影响超声波提取工艺的因素：溶媒浓度 （70%乙醇、80%乙 醇、90%乙醇）、超声功率 （160 W 、240 W 、320 W ）和提取时间 （40 min、60 min 、 80 min ）进行优选。经过优选后的最优超声波提取方法为:乙醇浓度70%，超声波功 率 240 W ，提取时间 60min，每次溶媒用量为药材量的 10 倍，提取 3 次。超声波提 取方法的各项评价指标均优于传统提取方法，且所需时间明显小于传统提取方法。 3. 复方透皮贴剂的鉴别 运用薄层色谱法对复方透皮贴剂中的紫花地