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噬菌体展示肽与克隆抗体分析牛ifn-γ的抗病毒活性位点
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目 录
摘要……………………………………………………………………………………I
英文摘:要…………………………………………………………………………………III
1引言……………………………………………………………………………………………。1
1.1干扰素概述……………………………………………………………………….1
1.1.1干扰素的来源…………………………………………………………………..1
1.1.2干扰素的分类与特点…………………………………………………………..1
1.】.3干扰素丫概述………………………………………………………………..2
1.2噬菌体展示肽法用于分析功能蛋白的活性位点……………………………………3
1.2.1噬菌体展示技术综述…………………………………………………………3
1.:Z.2噬菌体展示技术的应用及前景………………………………………………4
1.3牛IFN.Y单克隆抗体的研究进展……………………………………………….4
1.4研究的目的与意义………………………………………………………………………………….5
2材料与方法…………………………………………………………………………………6
2.1材料………………………………………………………………………………………………………..6
2.I.1质粒、宿主菌、病毒……………………………………………………………6
2.1.2实验动物……………………………...……………………………………..6
2.1.3细胞、培养基、血清…………………………………………………………6
2.1.4酶和生化试剂…………………………………………………………………6
2.1.5主要仪器和设备………………………………………………………………7
2.2方法………………………………………………………………………………………………………..7
2.2.1鼠抗BolFN吖单克隆抗体与BoIFN-丫结合位点的分析……………………..7
1
2.2.2检测M13噬菌体ELISA方法的建立………………………………………1
2.2.3
BolFN吖亲和肽的筛选及鉴定………………………………………………12
2.2.4噬菌体展示肽与单克隆抗体鉴定BolFN吖抗病毒活性区域………………13
3结果与分析……………………………………………………………………………….15
3.1单克隆抗体与BolFN吖结合位点的分析……………………………………….15
3.1.3单克隆抗体与牛IFN-7结合位点的鉴定……………………………………18
3.2检测M13噬菌体ELISA方法的建立……………………………………………19
21.2.1兔抗M13KE多克隆抗体的制备与纯化……………………………………19
=I.2.2抗体标记及酶标抗体活性测定……………………………………………..19
3.2.3酶标抗体的鉴定……………………………………………………………。20
3.3BolFN吖噬菌体的筛选与鉴定……………………………………………………2l
:;.3.1BolFN吖噬菌体的筛选………………………………………………………。21
I
东北农业大学农学硕士学位论文
3.3.2
BolFN.^,噬菌
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