日粮硒对雏鸡免功能影响的机理研究.pdf

中文摘要 本研究以病理学、免疫学和流式细胞术等主要方法，研究高硒和低硒日粮对雏 鸡免疫器官生长发育、免疫器官细胞增殖与凋亡、脾脏抗氧化能力、以及细胞免疫、 体液免疫和红细胞免疫功能的动态影响规律和机理，为基础研究和生产实践提供理论 依据。研究包括两个动物试验。 实验一 日粮高硒对雏鸡免疫功能影响的机理研究 选用1日龄艾维茵肉鸡300只，随机分成5组，分别喂以玉米豆粕型对照日粮 (Se 0．2mg／kg)和高硒同粮(Se lmg／kg高硒I组，Se5mg／kg高硒II组，Se10mg／kg 高硒III组，Se 鸡胸腺、脾脏和法氏囊重量减轻，脏器指数减小，器官生长发育受阻。眼观变化见胸 腺、脾脏和法氏囊体积缩小。组织学观察显示，高硒II、III、Ⅳ组雏鸡胸腺皮质和髓 质区淋巴细胞数量减少，胸腺小体体积增大，中央区细胞核碎片增多；脾脏和法氏囊 淋巴细胞减少。胸腺、脾脏和法氏囊的超微病理变化以淋巴细胞和网状细胞的线粒体 病变和凋亡细胞数量增多为特征。②流式细胞术检测表明，高硒II、III、Ⅳ组雏鸡胸 胞分裂指数(PI)下降。日粮硒含量越高，变化趋势越明显，且与脏器指数的下降趋 势一致。③AnnexinV-FITC染色检测结果显示，高硒III、Ⅳ组雏鸡胸腺、脾脏和法氏 囊的凋亡百分率明显升高。TUNEL染色的定性研究显示，高硒III、Ⅳ组的胸腺、脾 脏和法氏囊中，染成棕黄色的凋亡细胞较对照组增多。电镜观察，凋亡细胞见典型的 超微结构特征，细胞核染色质浓缩边移，呈马蹄形或新月形。凋亡细胞增多的改变与 免疫器官生长发育受阻、淋巴细胞减少的变化一致。④高硒II、III、Ⅳ组雏鸡外周血 Ⅳ组雏鸡外周血淋巴细胞对刀豆素A刺激的细胞增殖反应减弱：血清IL．2含量降低。 雏鸡细胞免疫功能受损。⑤高硒II、III、Ⅳ组雏鸡血清IgG含量下降；高硒Ⅳ组雏鸡 花环率升高，红细胞免疫粘附功能受损。⑦高硒III、IV组脾硒含量升高，脾脏GSH—Px、 SOD酶和CAT酶活性下降、总抗氧化能力降低、MDA蓄积，造成脾脏结构和功能 损伤，细胞免疫和体液免疫功能受损。 实验二 日粮低硒对雏鸡免疫功能影响的机理研究 选用1日龄艾维茵肉鸡120只，随机分成2组，硒缺乏组日粮由购自西昌冕宁 的玉米、黄豆和小麦配制而成，硒含量为0．0342mg／kg，以亚硒酸钠为硒源使日粮硒 水平达0．2mg／kg构成对照日粮，试验期6周。结果显示：①低硒组雏鸡胸腺、脾脏 和法氏囊重量减轻，脏器指数减小。眼观变化见胸腺、脾脏和法氏囊体积小于对照组。 组织学观察低硒组胸腺、脾脏和法氏囊淋巴细胞减少，其中法氏囊在42日龄时，淋 巴滤泡内的淋巴细胞几近耗竭，网状细胞增生。胸腺、脾脏和法氏囊的超微病理变化 以淋巴细胞和网状细胞的线粒体病变和凋亡细胞数量增多为特征。②低硒组雏鸡胸 腺、脾脏和法氏囊细胞GoGl期升高，G2M期和PI降低，细胞分裂增殖能力受抑，免 疫器官生长发育受阻。③流式细胞术、TUNEL染色法和电镜观察显示，低硒组胸腺、 脾脏和法氏囊的凋亡细胞增多，此改变与免疫器官淋巴细胞数量减少的病变密切相 关。④低硒组雏鸡外周血CD3+T细胞和CD3+CD8+T细胞百分率程度不同地降低； 外周血淋巴细胞对刀豆素A刺激的细胞增殖反应减弱；血清几．2含量降低。雏鸡细 胞免疫功能受损。⑤低硒组雏鸡血清IgG、IgA和IgM含量降低，血清总蛋白、白蛋 白和球蛋白含量降低，体液免疫功能受损。⑥低硒组雏鸡红细胞C3bR花环率，IC花 环率变化不明显，发生原发性免疫功能低下。⑦低硒组脾硒含量降低，脾脏GSH—Px、 CAT活性和总抗氧化能力降低，MDA含量增加，脾脏组织结构和功能受损。 淋巴细胞分裂增殖能力下降，凋亡细胞数量增多，脾脏组织中抗氧化酶活性降低、过 氧化产物MDA蓄积，导致免疫器官生长发育不良，细胞免疫、体液免疫和红细胞免 疫功能降低。细胞分裂增殖能力下降、凋亡细胞增多和抗氧化能力降低、过氧化产物 蓄积是免疫功能受损的病理基础和机理。本研究首次全面系统研究了日粮硒对艾维茵 肉鸡免疫器官发育和免疫功能的影响规律及机制，为养鸡生产上确定硒的合理添加剂 量、诊断和防治硒缺乏症和硒中毒症提供了理论依据。 关键词： 高硒；低硒；免疫器官；细胞周期；凋亡；流式细胞术；雏鸡 Mechanismsoftheimmunefunctional ■ · ·