特异腐质霉huicola insolens(yh-8)纤维素酶的分离纯化及性质研究.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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特异腐质霉huicola insolens(yh-8)纤维素酶的分离纯化及性质研究.pdf

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特异腐质霉huicola insolens(yh-8)纤维素酶的分离纯化及性质研究

特异鹞疆霉Humtcola irLsolen(YH-8)纤维索酶的分离境纯技性磺讲究摘要特异腐质霉Humicola insolens(YH一8)培养混合物，通过超声波破碎细胞壁，确定该菌所产的酶为细胞外酶，经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定粗酶液的组分不少于5个。特异腐质霉Humicola insotens(YH一8)纤维素酶粗酶液经过I、5倍酒精沉淀， DEAE—Sephdex G一10D凝胶过滤，得到电泳纯的纤 A一50离子交换层析，SepMex 维素酶两个组分，酶1分子量约为55kD，酶2分子量约为80kD。研究了纯化后的纤维素酶的催化性质。以羧甲基纤维索为底物时，酶l的最 4C，在50℃以下稳定性较好，底适催化温度为60C，酶2的最适催化温度为65 物对酶有较强的保护作用；酶1和酶2的最适pH分别为5．5和5．5～6．0，酶1的对酶l有激活作用，K十，Li+对酶2有激活作用：酶1主要对CMC和水杨素有分解作用，对其它底物几乎不分解：酶2除了可以分解CMC和水杨素外，对其它底物也有微弱的分解作用。关键词：特异腐质霉纤维素酶：酶谱；纯化：催化性质一一型堡堡堡坐竺竺丝竺塑!坐!!丝塑墅丝墨!竺丝垄墅堕 ABSTRACT Theculturalmixturefrom Humicola insotens wassmashed ultrasonic by crashing intrumentandwecanknowthat thiscellulaseisoutside—cell The enzymes enzyme indentified than hasmore 5 bypolypropylenegelelectrophoresis groups． from ThesecretedcellulasesHumicola insolensis meansofI，5foIds purifiedby volume ethanol A一50 and deposition，DEAE—Sephadex chromatography G-100 cellulaseshoweda band DEAE—Sephadexchromatography．Thepurified single on