缺硒对鸡肠道免功能的影响.pdfVIP

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2016-02-20 发布于贵州
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缺硒对鸡肠道免功能的影响.pdf

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缺硒对鸡肠道免功能的影响

目录目录中文摘要……………………………………………………………………………………I 英文摘要…………………………………………………………………………………。III 1弓I言…………………………………………………………………………………………………………………．．1 1．1硒与硒蛋白…………………………………………………………………………………．1 1．1．1硒蛋白的分类、功能及定位……………………………………………………．1 1．1．2硒对组织硒蛋白的调控…………………………………………………………4 l。1．3硒与肠道疾病…………．．j…………………………………………………………5 1．2肠道免疫应答与氧化应激…………………………………………………………………．5 l。2．1细胞因子在肠道免疫中的作用…………………………………………………．5 1．2．2免疫球蛋白在肠道免疫中的作用………………………………………………．7 l。2．3肠道氧化应激与免疫应答………………………………………………………8 1．3实验目的与意义……………………………………………………………………………．9 2材料与方法………………………………………………………………………………10 2．1主要仪器与试剂……………………………………………………………………………10 2．1．1主要仪器………………………………………………………………………．10 2．1．2主要试剂…………………………………………………………………………10 2．2实验动物分组………………………………………………………………………………1l 2．3检测项目与方法实验方法…………………………………………………………………12 2．3．1肠道组织中总RNA提取和eDNA合成………………………………………．12 2．3．2肠道组织中23种相关硒蛋白mRNA表达的检测……………………………13 2．3．3肠道组织中免疫球蛋白与细胞因子相关基因mRNA表达的检测……………15 2．3．4肠组织中热休克蛋白mRNA表达的检测………………………………………17 2．3．5实时荧光PCR法检测结果的分析方法………………………………………．．17 2．3．6肠道组织中相关黏膜免疫球蛋白ELISA的检测………………………………18 2．3．7肠道组织中抗氧化功能的检测方法……………………………………………18 2．3．8Western blot对目的基因蛋白的检测…………………………………………一18 2．3．9肠道组织病理学观察……………………………………………………………19 2．4实验数据统计学分析……………………………………………………………………。19 3结果与分析…………………………．．…………………………………………………．20 3．1病理学观察…………………………………………………………………………………20 3．1．1剖检变化………………………………………………………………………．20 3．1．2肠道组织病理组织学观察……………………………………………………．．20 3．2荧光定量PCR检测方法的建立…………………………………………………………．20 3．2．1肠道组织中总RNA的提取与鉴定……………………………………………．20 3．2．2荧光定量PCR检测方法的建立…………………………………．……………21 3．3硒缺乏对肠道组织中硒蛋白基因表达水平影响的检测结果……………………………24 3．3．1十二指肠中23种相关硒蛋白mRNA水平的检测结果………………………．24 33．2小肠中23种相关硒蛋白mRNA水平的检测结果……………………………．26 3．3．3直肠中23种相关硒蛋白mRNA水平的检测结果……………………………．29 3．4硒缺乏对肠道组织中免疫球蛋白和细胞因子相关基因表达水平影响的检测结果……31 I 东北农业大学农学硕士学位论文 3。4。l十二指肠道组织中免疫球蛋白及细胞因子mRNA水平的检测结果…………31 3．4．2小肠