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表达h
摘要
禽流感(Avian
染病，它的流行与暴发给养禽业造成了巨大的经济损失。寻找安全有效的AIV疫苗
是众多学者研究的热点，近年来随着基因工程的研究进展，基因工程疫苗已经成为防
治该病的主要手段。
influenza
virus，
本研究根据GenBank已经发表的H5Nl亚型禽流感病毒(Aivan
增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联。
从感染火鸡疱疹病毒(Turkey
中提取病毒总基因组，选择病毒的非必须区USlo区为外源片段的插入区域，根据
因组为模板用PCR的方法获得USl01和USlo片断。按照PMDl8一T载体的说明将
BamHI和EcoRI酶切，将USl01克隆于PMDl8．T-USl02中，从而得到新的质粒命名
为pUSlo．
体转染的方法共同转染次代CEF，待病毒蚀斑出现后，铺营养琼脂进行培养，利用挑
斑和有限稀释的方法筛选带有绿色荧光的病毒蚀斑，进行数轮蚀斑纯化，经荧光和
PCR初步鉴定获得了重组火鸡疱疹病毒。
本实验运用回收，转化，质粒提取等多种分子生物学实验技术获得了表达禽流感
HA和NA基因的重组火鸡疱疹病毒，为今后禽流感基因工程苗的研究奠定了坚实的
基础。
关键词： 禽流感病毒；HA及NA基因；重组火鸡疱疹病毒；转染；筛选
Constructionofrecombinant HAandNA of
herpesvirusexpressing genesHsNISubtype
turkey
AvianInfluenzaVirus
Author：Zhao
Dong
Feng
Medicine
Veterinary
Speciality．Preventive
AssociateProfessor．GaoXuanProfessor．Li
Supervisor： Mingyi
Abstract
influenzaA
Avian oneoftheacuteandfatalinfectiousdiseasescaused virus．
Influenza(AI)is by
in
The ofAIhasculminatedintremendouseconomiclosses to
industry．Efforts
epidemic poultry
asafeandeffectivevaccineis
developing hotspot．Witllgeneticengineering
the means theAI．
vaccinehasbeen
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