4 实验四 淀粉酶活性测定(2010级--柯-20111106-2).pdfVIP

《植物生理生化实验Ⅰ》 《植物生理生化实验》  （45学时） 2011­2012学年 第一学期：《植物生理生化实验Ⅰ》 21学时 第二学期：《植物生理生化实验Ⅱ》 24学时 福建农林大学生命科学学院-植物生理生化实验室 幻灯片 1 微软中国1 微软中国, 2009-2-15 《植物生理生化实验Ⅰ》 实验五 淀粉酶活性的测定 福建农林大学生命科学学院-植物生理生化实验室 《植物生理生化实验Ⅰ》 一、测定意义： 淀粉酶普遍存在于植物体内，特别是萌发后的 禾谷类种子淀粉酶活性最强； 淀粉酶活性高低可以衡量种子萌发速率； 淀粉酶活性高低作为水稻抗逆性的生化指标 （如干旱、盐、重金属胁迫）； 。。。。。 福建农林大学生命科学学院-植物生理生化实验室 《植物生理生化实验Ⅰ》 二、目的要求： 1、了解α－淀粉酶、β－淀粉酶的不同点及其 淀粉酶活性测定的意义；  2、掌握恒温水浴的控温方法；  3、学会用比色法测定淀粉酶活性的原理及其操 作要点；  4、比较不同发芽水稻种子和吸胀水稻种子淀粉 酶活性的差异。 福建农林大学生命科学学院-植物生理生化实验室  《植物生理生化实验Ⅰ》 三、原理： 根据α－和β－淀粉酶的理化性质 α－淀粉酶不耐酸，在pH3. 6以下迅速钝化； β－淀粉酶不耐热，在70℃15min则被钝化。 α-淀粉酶提取液 1、淀粉酶提取 70℃ 15分钟钝化β-淀粉酶 β -淀粉酶提取液 pH3.6 以下0℃ 钝化α-淀粉酶 福建农林大学生命科学学院-植物生理生化实验室 《植物生理生化实验Ⅰ》 淀粉酶  2、(C H  O )n + 0.5n H O                0.5n C  H  O  6  10  5  2  12  22  11  40℃ 3、C  H  O  + 3，5－二硝基水杨酸  3­氨基­5­硝基水杨酸 12  22  11  淀粉酶活性与产生的还原糖量成正比 棕红色产物 λmax=540nm  福建农林大学生命科学学院-