生物工艺学 谷氨酸的生产工艺.pdfVIP

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L-Glu C H NO 5 9 4 主要内容 简介(性质、用途); 发酵机制; 发酵流程; 菌种; 培养基(淀粉制糖); 发酵过程和方法(包括工艺控制等); 提取纯化; 所用设备。 第2页,共69页 一 简介 酸性or碱性? L型or D型? 溶解性:微溶于冷水,易溶于热水,几乎不溶 于乙醚、丙酮及冷醋酸中,也不溶于乙醇和甲 醇,溶于盐酸溶液。 等电点:3.22; 安全性和用途 ; 味精是谷氨酸单钠盐,带有一分子的结晶水, 学名叫α-氨基戊二酸一钠。 1957年发酵法生产谷氨酸在日本协和发酵公 1957年发酵法生产谷氨酸在日本协和发酵公 司投产。 司投产。 第3页,共69页 二 发酵机制 谷氨酸的生物合成途径大致是:葡萄糖经EMP途 径或HMP途经生成丙酮酸,再氧化成乙酰辅酶 A ,然后进入TCA ,再通过乙醛酸循环、CO2 固 定作用,生成a-酮戊二酸,a-酮戊二酸在谷氨酸 脱氢酶的催化及有NH4+存在的条件下生成谷氨酸 PEP羧化酶 PEP+CO +GDP 草酰乙酸+GDP 2 CO 2 苹果酸酶 苹果酸脱氢酶 丙酮酸 苹果酸 草酰乙酸 NAD+ NADH+H+第4页,共69页 谷氨酸生产菌能够在体外积累菌体最大生长 需要量300多倍的谷氨酸,研究发现:大量 积累并非是当初设想的由于特异代谢途径导 致,而是: 代谢调节控制; 细胞膜通透性的特异调节; 发酵条件的适合。 第6页,共69页 在微生物的代谢中,谷氨酸比天冬氨酸优 先合成。谷氨酸合成过量时,谷氨酸抑制 谷氨酸脱氢酶的合成,使代谢转向合成天 冬氨酸;天冬氨酸合成过量后,反馈抑制 磷酸烯醇丙酮酸羧化酶的活力,停止草酰 乙酸的合成。所以,在正常情况下,谷氨 酸并不积累。见图3~27。 第7页,共69页 乙醛酸循环 谷氨酸产生菌大多为生物素缺陷型,谷氨酸发酵时通过控 制生物素亚适量,使最后一代细菌细胞变形、拉长,改变 了细胞膜的通透性,引起代谢失调,使谷氨酸得以积累。 谷氨酸高产菌株丧失或仅有微弱的a-酮戊二酸脱氢酶活 力,使a-酮戊二酸不能继续氧化;CO2 固定反应的能力 强,使四碳二羧酸全部是由CO2 固定反应提供,而不走乙 醛酸循环,以提高对糖的利用率;谷氨酸脱氢酶的活力很 强,并丧失谷氨酸对谷氨酸脱氢酶的反馈抑制和反馈阻 遏.同时NADPH 再氧化能力弱,这样就使a-酮戊二酸到 2 琥珀酸的过程受阻,在有过量铵离子存在的条件下,a-酮 戊二酸经氧化还原共遏氨基化反应

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