h3n8亚型马感病毒内蒙古株全基因序列分析及ns1基因的原核表达.pdf

摘 要 influenza，E1)是由马流感病毒引起的一种急性、高度接触 马流感(Equine 性的马属动物呼吸道传染病。近年来，随着国际马术赛事的蓬勃兴起以及马属动 物流动范围扩大等原因，致使EI在全球上频繁暴发、流行弗由此对赛马业等构成 了严重威胁。因此，从分子水平上阐明EIVH3N8亚型的流行规律，不仅在病毒学 研究领域中有重要的学术意义，而且对EI防控也具有实用价值。 本研究先将内蒙古株A／equine／Inner 提取病毒核酸，根据EIV8个基因片段的3’末端高度保守的核苷酸序列特点， 设计一条反转录引物，根据GenBank已发表的H3N8亚型EIV8个基因的eDNA序 8 因的序列片段，将它们连接到pMDl8-T载体上。序列测定及分析结果显示，EIV 99．2％，两者各基因有着相似的遗传演化过程。 切鉴定为阳性的重组质粒再转化到感受态细胞BL21(DE3)中，挑选含重组质粒 养5h，pET—NSl融合蛋白表达量达到高峰，以包涵体形式存在，目的蛋白与载体 融合蛋白能与H3N8亚型马流感病毒感染马阳性血清发生特异性反应，具有良好的 抗原性。 关键词：马流感病毒；全基因；基因克隆；原核表达 Genome of InfluenzaVirus Equine SequenceAnalysis H3N8 Inner Strainand Mongolia Subtype ofNS1 Gene ProkaryoticExpression Abstract infectiousdiseasewhich influenza(EI)is锄acutecontagiousrespiratory Equine forhorses．Inrecent theinternationalhorse iScommon years，with racingincreasing the and the threatshorse becauseof outbreak and seriously racing enlarging，it scope not on and influenza．Itis veterinary ofequine verysignificantonlyvirology epidemic butalsoon andcontrol infuelizathatmasterthe medicine equine study prevent ofEIV H3N8onmolecularlevel． epidemicregularitysubtype is