安徽部分地区鸭里氏杆菌的分离鉴定及其生物学特性研究.pdfVIP

中文摘要 鸭疫里氏杆菌病是由鸭疫里氏杆菌(Riemerella 要侵害雏鸭、雏火鸡等多种禽类的急性或慢性传染病。该病的发病率和死亡率较高， 已成为目前危害世界各国养鸭业最为严重的传染病之一，给养鸭业造成了巨大的经济 损失。RA现已发现21个血清型，各血清型之间很少有交叉保护性；对于已感染RA 的鸭群，经常用药易产生耐药菌株。因此，建立快速检测RA的方法、了解RA血清 型的变化趋势以及开展RA疫苗方面的研究，对于该病的有效防制是十分必要的。 16S 本研究根据RA rRNA基因序列设计一对RA特异性引物，成功地建立了检测 删的PCR方法，特异性强，同时该PCR方法能检出20DNA，灵敏度高，这为 pg的RA RA的检测提供了一种快速、敏感、特异性强的检测方法。应用该PCR方法对病料组织 直接进行RA检测，脑组织为首选检测对象，具有良好的实际应用意义。 利用常规方法和建立的PCR方法对安徽省滁州市、六安市、安庆市、合肥市、 巢湖市和蚌埠市六个地区108份病／死鸭进行RA检测，六个地区均检测出RA，阳性 安徽地区RA的感染较为普遍，滁洲地区感染情况严重。 安徽省目前至少存在两种不同的血清型，而2000年以前的分离株均属血清1型，说 明安徽省RA流行菌株的血清型存在动态变化，血清型呈现多极化的趋势。 对安徽省RA分离株的16SrRNA基因和cam基因进行扩增和序列测定，并与国 内外参考菌株进行同源性比较，结果表明不同血清型、同一血清型的不同菌株之间及 16S 不同地区的菌株之间16SrRNA基因序列无明显差异，RArRNA基因核苷酸序列 差异的距离与地理分布、菌株来源无一定的相关性；不同毒力株之间cam基因并无 明显差异，根据cam基因无法判断不同菌株的毒力强弱。 通过动物回归试验，测定8株RA分离株的毒力，其中CZ9和AQ2为弱毒菌株， 好，故将其作为弱毒疫苗株的候选株，进一步测定CZ9的最佳免疫剂量为8．0x108CFU／ 0．1mL，从而为RA弱毒疫苗的研制提供了一定的基础数据。 关键词：鸭疫里氏杆菌，PCR，血清型，疫苗 IV Abstract Riemerella isaacuteorchrome diseaseof anatipestifer(删)infectioncontagious domestic variousotherdomesticandwildbirds．Itaccountsfor youngducks，turkeys，and economiclossesdueto and asisa morbiditymortality,known significant high major theduck theworld．To1 havebeen disease date，2 confrontingindustrythrough serotypes CROSSreactionWasfoundbetweendifferent addition,resistant reported，little serotypes．In witIl ofantibioticsTheiterativeantibioticstreatmentis strains the appear application fortheoccurrenceofresistantstrains