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影响绵、山羊体胚胎生产主要因素的研究
摘要
本研究系统地探讨了体外受精中的诸多影响因素,以期建立一套比较完善的绵、
山羊体外受精的操作体系。研究的主要内容为:绵羊体外受精影响因素和山羊体外受
精影响因素。
在绵羊体外受精中,研究了不同体外受精培养体系(SOFaa和CRlaa)、不同卵
液中不同FSH剂量和激素组合、FBS的灭活处理、10%新鲜PFF的添加、不同受精
液种类和精子制备方法以及发育培养是否换液对绵羊IVM/IVF/IVC的影响,结果表
会显著降低受精卵裂率,25℃是绵羊卵巢较合适的保存温度;抽吸法每个卵巢平均获
得1.43±0.36枚可用卵,抽吸后的卵母细胞再用切割法采卵,还可以获褥与抽吸法数
量相当的可用卵(1.164-0.3枚),但即使两种方法综合运用,仍显著低于切割法获得
上,绵羊卵母细胞IVM时问以21h~24h的效果较好;FSH对绵羊卵母细胞体外成熟
FSH效果
是必不可少的,添加FSH显著提高受精卵裂率(Po.01),以添加2099/ml
最佳:LH和E2对绵羊卵裂率和桑一囊胚发育率无显著作用(PO.05):血清灭活处理
对卯裂率无显著影响(PO.05),但有提高胚胎发育率的趋势;在10%灭活FBS的基
础上再添加10%新鲜PFF对卵裂率没有影响,但能显著提高桑.囊胚发育率(41.38%
裂率和胚胎发育率均好于上浮离心法;应用SOFaaBSA混合气培养绵羊IVF胚过程
中换液操作显著提高了胚胎发育阻滞率(PO.05),降低了桑.囊胚发育率。
AU/ml、0.02
在山羊体外受精研究中,比较了不同厂家FSH、不同FSH剂量(O
27h)、氨基酸、不同受精液种类(mSOF、SOF、BO)、不同发育培养液及培养方法、
山羊的IVM/IVF有负面影响,使桑一囊胚发育率显著降低(Po.05);山羊卵母细胞成
裂率(PO.05),桑-囊发育率也有所提高(PO.05);不同受精液的受精卵裂率和桑.
囊胚发育率差异不显著(Po.05),改良的无糖mSOF受精液可能具有提高受精卵裂
相比无显著差异(PO.05):卵丘细胞单层共培养可以成功的使山羊受精卵发育到桑一
囊胚阶段;序贯培养的卵裂率和桑一囊胚发育率并没有显著提高(PO.05);负压低氧
不利于山羊的IVF,使受精卵裂率极显著降低(PO.01),对受精卵的胚胎发育率无
显著提高作用(PO.05)。
本研究将30枚4~8.细胞山羊IVF胚胎移植到8只受体羊输卵管中,3个月后用
关键词:山羊;绵羊:体外受精;体外成熟:胚胎;负压培养
Main on andGoat Productioninvitro
Effectofthe Factors Embwo
Sheep
Author:Wei
Hengxi
and
Major:AnimalGenetics,BreedingReproduction
Runzi
Advisor:Sang
Abstract
withinIVFwere
influencefactors this
in for
Many experimentedsystematicallystudy
the IVF
sakeof an on and mainconten
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