捻转血矛线虫体培养条件优化和h11蛋白提取及氨肽酶活性分析.pdfVIP

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2016-02-22 发布于贵州
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捻转血矛线虫体培养条件优化和h11蛋白提取及氨肽酶活性分析.pdf

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捻转血矛线虫体培养条件优化和h11蛋白提取及氨肽酶活性分析

目录中文摘要………………………………………………………………………………………………．．V 英文摘要………………………………………………………………………………………………一Ⅵ 1弓I言……………………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1捻转血矛线虫病概述……………………………………………………………………………．1 1．1．1病原学………………………………………………………………………………………1 1．1．2流行状况…“………………………………………………………………………………2 1．1．3症状和病理变化……………………………………………………………………………3 1．1．4诊断与防治…………………………………………………………………………………3 1．2捻转血矛线虫抗原的研究进展…………………………………………………………………3 1．2．1隐蔽抗原(Hidden antigen)……………………………………………………………4 1．2．2天然抗原(Naturalantigen)……………………………………………………………．．6 ’1．2．3重组抗原(Recombinant antigen)………………………………………………………．．7 1．3捻转血矛线虫体外培养方法的研究进展………………………………………………………8 1．4捻转血矛线虫疫苗的研究进展…………………………………………………………………11 1．5本研究的目的和意义…………………………：………………………………………………。13 2材料与方法…………………………………………………………………………………………．14 2．1材料……………………………………………………………………。……………………………………………………14 2．1．1实验所用虫种……………………………………………………………………………．14 2．1．2实验动物…………………………………………………………………………………．．14 2．1．3培养基……………………………………………………………………………………．14 2．1．4实验所用主要溶液………………………………………………………………………．．14 2．1．5主要实验仪器与设备……………………………………………………………………．．15 2．2方法……………………………………………………………………………………………………………………………16 2．2．1捻转血矛线虫虫卵采集与孵化…………………………………………………………．．16 2．2．2第三期幼虫的收集净化与脱鞘…………………………………………………………一17 2．2．3第三期幼虫的接种和培养………………………………………………………………一17 7 2．2．4捻转血矛线虫L4幼虫及成虫Hll蛋白的提取与纯化…………………………………．1 2．2．5H1 1蛋白的浓缩与纯化……………………………………………………………………．18 2．2．6测定Hll氨基肽酶酶活性………………………………………………………………．．19 2．2．7测定HII氨基肽酶酶抑制剂敏感性……………………………………………………一20 3结果…………………………………………………………………………………………………………………………………～21 东北农业大学农学硕上学位论文 3．1虫卵、各期幼虫及成虫形态特点……………………………………………………………．．2l 3．2温度对捻转血矛线虫虫卵孵化为L3幼虫的影响……………………………………………23 3．3不同培养基对捻转血矛线虫从L3发育到L4期幼虫的影响…………………………………23 3．4不同pH值对捻转血矛线虫L3的发育及对L4的影响………………………………………24 3．5．1HI 1提取蛋白的SDS—PAGE分析……………