猪发酵床养殖中孢杆菌菌株的筛选、鉴定及产蛋白酶条件的优化.pdfVIP

四川农业大学硕七论文 中文摘要 优良高活性芽孢杆菌菌株的筛选是发酵床养猪的技术关键，而优良高活性 芽孢杆菌菌株只有具有生长繁殖速度快，含分解粪污有害物质的酶量多且对大 肠杆菌、沙门氏菌等有害细菌具有显著的抑制作用、能够使猪粪尿中的有机物 质得到充分的分解和转化等特性，才能达到发酵床养猪的目的。 从本地猪场采集样品分离得到20株芽孢杆菌菌株，对20株芽孢杆菌菌株 分泌蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶的活力进行了初筛和复筛，初筛采用平板培养、 染色法，复筛采用分光光度计比色法来测定芽孢杆菌培养液酶活力。筛选出了 胞外酶活力高的2株芽孢杆菌，其编号分别为Ybl6、Ybl7，其分泌胞外酶活分 别达到：蛋白酶2．509 U／ml(Vbl6)、2．576 以3株常见的条件性病原微生物为指示菌，采用双层琼脂平板法对2株芽 孢杆菌进行抑菌试验，筛选到芽孢杆菌Ybl7具有较好的抑菌效果，可作为备 用菌株。 利用形态学观察，生理生化试验，及16SrRNA序列测定，与GenBank序 列比对，菌株Ybl7鉴定为巨大芽孢杆菌。 芽孢杆菌Ybl7对酸和胆盐的耐受能力较强，小鼠安全性试验结果表明，