用ddrt-pr技术筛选仔猪腹泻抗性候选基因.pdfVIP

摘要 仔猪腹泻是养猪生产中存在的普遍疾病，是影响养猪业经济效益的重要因素。从遗传上提 高仔猪对腹泻的抵抗能力是减少仔猪腹泻发生率的最有效手段。检测疾病抗性QTL或基因可以 往不进行疾病攻击下进行选择。蒉异显示反转录PCR(DDRT．PCR)技术，可比较不同细胞或相 同类型细胞在不同条件FmRNA的表达差异。其用于疾病研究即可检测某一疾病状态的特定细 胞型的基因表达情况。这些基因的有关知识可帮助理解疾病的病理过程抗性遗传控制，并可 应用于育种程序。 我国的一些地方猪种(如贵州久仰香猪)对仔猪腹泻具有很强的抵抗能力。是研究仔猪腹 泻抗性分子遗传基础的宝贵材料。本试验以久仰香猪、剑白香猪和长白猪三个品种为材料。以 晶种间同一组织(胸腺、脾脏、小肠)不同的发病状态为对照及久仰香猪小肠对大肠杆菌的不 同粘附型为对照，RNA样品混池后，采用3条锚定引物x7条随机引物．共21个引物组合，硝 酸银显色，进行差异显示研究，筛选相关特异表达基因，并确定与仔猪腹泻抗性有关的候选基 闳。 在胸腺未发病池中检测到网格相关蛋白、SOP2及HPK／GCK—LIKE KINASE(HGK)三条序列的 特