百脉根dreb录因子基因部分序列的克隆及desc基因转化.pdfVIP

摘要 低温是影响植物生长、发育的重要因子之一，在抗寒锻炼中，植物体内会发生多种生理生化 反应，其中包括膜质脂肪酸不饱和性降低，低温诱导基因表达等。脂肪酸的不饱和性对植物抗寒 性有重要影响，在多种植物的研究表明编码脂肪酸脱饱和酶的基因是提高植物抗寒性育种的选择 之一．低温诱导基因的表达具有稳定细胞质和细胞膜的作用，DREB转录因子可以启动整套低温 诱导基因的表达，具有抗寒锻炼的作用，同时可以提高植物抗旱和耐盐特性．本文研究包括A9 脂酰脱饱和酶基因desc在百脉根中的表达和DREB基因部分序列的克隆。研究结果如下： 转化效率较高于后者，但后者在工程菌株中的拷贝数较高，便于基因操作，也可作为desC基因植 物表达载体。 在农杆菌培养至ODⅢ为0．6，侵染百脉根子叶20rain，共培养3d的转化效率最高，为21．7％． 卡那霉素对百脉报抗性愈伤筛选的适宜浓度为50mg／L。在侵染菌液中加入乙酰丁香酮会降低百脉 根的转化效率，在共培养基中加入乙酰丁香酮可提高百脉根的转化率，浓度为10mUL时百脉根的 转化效率可达23．3％。 desC基因的转入提高了百脉根的抗寒性．转基因植物叶片中16：1单不饱和脂肪酸含量明显高 于对照植株，而16：0、18：0的含量低于对照植株；0C低温处理下