重组组织型纤溶酶原激活剂变异体（RETEPLASE）工程菌的培养和体外复性的研究.pdf

摘要 重组组织型纤溶酶原激活剂变异体(RETEPLASE)工程菌的培养 与体外复性的研究 摘要 目前，蛋白质作为新兴的大分子药物正进行着前所未有的研究和开发。通过 重组DNA技术，可以使目的基因有效的在异源宿主细胞中实现转化和表达，但 宿主细胞对于重组蛋白的数量和质量有较大影响。由于原核细胞和真核细胞在蛋 白的翻译、翻译后修饰以及折叠的机制不同，因此在细菌宿主如大肠杆菌 (Escherichia coZOep生产动物蛋白常常无法获得可溶的、有天然活性的蛋白。 Reteplase(中文商业用名瑞替普酶)是第三代溶血栓药物，该产品不但生产 工艺简单，在临床上更具有药物半衰期长、溶栓作用强、副作用小等优点。 II、蛋白酶两个功能域及N端的3 基础上进行了功能域的删除，保留了kringle 个氨基酸；该重组突变体是单链非糖基化蛋白，由355个氨基酸组成，分子量约 为39kD，含9对二硫键，是一种在体外很难复性的蛋白。 尽管现已发现不少表达宿主，当目的产物的功能不依赖于糖