亚临界r134萃取-高效液相色谱联用技术对水产品中激素残留检测的研究.pdfVIP

亚临界R134a萃取一高效液相色谱联用技术对水产品中激素 残留检测的研究 摘要 近几年新出现的亚临界流体萃取技术，可以在比较低的压力下实现比较好的 萃取效果，克服了超临界C02萃取存在的一些缺点，因而受到了越来越多的重视。 MPa)易于 由于1，1，1，2一四氟乙烷(R134a)具有临界条件(Tc=101．1℃，Pc=4．06 达到、低毒、惰性、不易燃以及不破坏臭氧层(ODP=0)等特点，所以成为亚临 界流体的首选。蛋白同化类激素，能促进畜禽生长，提高饲料转化率，有利于蛋 白质的沉积，提高产量，而被用于水产养殖行业。但蛋白同化激素在动物食品中 的残留可能会危及消费者的健康，具有潜在的致癌性。但由于利益驱动，一些同 化激素仍然被一些养殖户偷偷使用，因此建立可靠、快速、方便、绿色的分析方 法对水产品中激素残留量进行监控是很有必要的。本文通过建立亚临界R134a萃 取一高效液相色谱连用技术对鱼肉中激素残留检测进行了研究。 论文通过设计正交试验和响应曲面，用亚临界R134a流体萃取罗非鱼肌肉中 的丙酸睾酮、甲基睾酮和醋酸甲羟孕酮残留，经过传统液一液萃取和C。8固相萃取 小柱除杂，然后用高效液相色谱仪检测。探讨了萃取压力、萃取温度、萃取时间、 共溶剂用量等多种因素对激素回收率的影响作用，并对不同种类的性激素，进行 了萃取条件的优化选择。实验结果如下： 1．用正交试验优化了亚临界R134a萃取鱼肉中丙酸睾酮残留，甲醇收集液 用石油醚脱脂纯化，然后用高效液相色谱仪检测。得到最佳的实验条件：萃取压 力14MPa，萃取温度23℃，R134a流量10g／min，静态萃取30min，动态萃取 40min，共溶剂甲醇添加量2mL，收集液为甲醇。根据极差大小，可以判断各 因素对丙酸睾酮回收率的影响程度，因素的主次关系为：萃取压力动态萃取时 间萃取温度。在最优条件下，方法灵敏度高，重现性好，检出限为2．01．tg／kg， 丙酸睾酮的加标回收率均大于90％、相对标准偏差(RSD)小于5％。 2．用响应曲面优化了亚临界R134a萃取鱼肉中甲基睾酮残留，甲醇收集液 用C18固相萃取小柱纯化，然后用高效液相色谱仪检测。得到最佳的实验条件： min， 萃取压力5MPa、萃取温度31℃、共溶剂甲醇用量3．35mL、静态萃取30 min，R134a流量10 动态萃取40 g／min。在最优条件下，方法灵敏度高，重现性 好，检出限为5．0gg／kg，甲基睾酮的加标回收率均大于90％，RSD小于3％。 通过对模型的分析发现，共溶剂甲醇用量极显著，萃取压力和萃取温度显著，二 次项萃取压力和共溶剂用量显著，萃取压力和共溶剂用量的交互作用显著。 3．用响应曲面优化了亚临界。R134a萃取鱼肉中醋酸甲羟孕酮残留，甲醇收 IV 集液用C18固相萃取小柱纯化，然后用高效液相色谱仪检测。得到最佳的实验条 rain， mL、静态萃取30 件：萃取压力3MPa、萃取温度25℃、共溶剂甲醇用量6 动态萃取40min，R134a流量10 g／rain。在最优实验条件下，方法灵敏度高，重 现性好，检出限为5．0 pg／kg，醋酸甲羟孕酮的加标回收率均大于95％，RSD小 于5％。通过对模型的分析发现，共溶剂甲醇用量极显著，萃取压力和共溶剂用 量的交互作用以及萃取温度和共溶剂用量的交互作用显著。 本方法在国内外首次利用亚临界R134a萃取作为兽药残留分析样品的前处 理技术，相比于超临界C02萃取，萃取压力和萃取温度都比较低，易于大规模 34a萃取过程只需1h左右，有机溶剂用量仅为常规方 推广应用。整个亚临界R1 法的1／