芸苔属蔬菜重金累积特性及抗cd基因的差异表达与克隆.pdf

摘 要 秘致癌物之一，最磊在肾毒骨髂中矢量积幕，每致簧磅毽衰竭、骨软记静嚣碎。 我闽有严重cd污絷农田，分布在包括福建省柱内的11省区。与其它“四毒”相 比，进入土壤的cd主要分布在耕作层，一般不被土壤固定，易于被作物峨收， 蔬蘩蒸咔可食零镣更容易累驭翻。我国蔬摹恶产量年3。45瓴t，住居世嚣第一。 城乡菜篮子基地尖多位于城郊置妲区，蔬菜用地普遍受城乡羔业污染，各天城市 蔬篡cd含量平均燎国家卫生标准的2-3倍，靛高迭5．2倍．八世后，属于劳动 密集型鲢、易于出甜创汇的蔬菜产业，却因其激生品质问题，削弱其在国际市场 媾竞争力。治理ed污染土壤、玲低蔬菜秘舍量，适在蔗穗。 本研究以24个芸苔属蔬菜基因型为材料，期望从蔬菜种质资源申筛魄出： ①抗cd基因型即cd低累积基因型用于低cd含量、高卫生品质蔬菜育种与生产； ②霹cd基双型黟镰高富集基戳整羁于ed污染土壤修复。主受结暴如下： 1．研究出秀于控制误差的滚室*JC-斌Jjt依系：应用娥篇代替土壤育筒，默 去离子水代替自采水配制营养液，以塑料网兜、珍珠岩石和凝料泡沫等简易材料 固定棱椿，撂索出易于控制蔬慕重金属离子误蔗砖温室水培试验体系； 2+夺鸯菜蕉叶衾薅零往蔻ed裹教争分配驹每往：在125”mol。L。戆Cd、 3．34 Pb、^s等3种重余属浓度胁迫下，13个小白菜基因型茎叶平均cd含量为37 mg．kg～，国 mg．kg。1(国家卫生窝全标准高限为0．20mg．kg。)，分别是Pb(62．20 离限为0．70m昏kg。)的6．o和13．6倍．说明Cd池Pb、As更秀在茎，}食用部位累 积，也说明了小由菜食用部位(莲叶)是Cd累积和分配的部位。 3．筛选出抗傩和耐cd的小白菜基因型：设置不同cd胁遗浓度，结合最适 合辘媵连浓度争生理生纯霹栏耱褥霹究，簿选蠢小白菜巍ed基鑫壁《煞累积》 Cd胁迫下，二 “Dr—SH0”和耐cd基因型(高富集)“Kt-RBD”．在50umol，L1 mg．kg～，后者是前者4．97倍，分别是 者燕叶cd含量分别为114．87和699．92 13令小白菜基因型莲咔平均含薰的36。8％和182。629；其c娃麟性糍数分剐达到 97．8*和91．5x，说胡两夺基薄戮在ed痨逶下都自l正常生妖，可分髓律务低ed 含謦、高卫生品质蔬菜育种和cd污染土壤修复的材料。 小白菜釜叶 4．检测到小白菜茎叶cd低累积和高富纂相关的RAPI)标记： 610bp；以及结臻甘篮茎叶高富浆RAPD标记1个，长度为470bp。说明芸营属蔬 慕蕊叶食用部位cd累积特性的麓异有其遗传背景，在cd胁迫下，“Dr—sI{o”和 “Kt—RBD”的抗，耐Cd基因都得到表达． 5．获得5个小白幕ed抗、对挂基因差异表迭片段：Cd胁遵下，研究“Dr～SilQ” 和“Kt—RBD”的饼抗，耐性基鹳的差异表这，结果共获得23个差异茸段。葵中 芥警重金属解毒代谢的限速酶一半胱氨酸合成酶的编码基因同源性逮81％一96％； 蔗投Cddl5与缡璃金属硫蛋白企畿酶基西有78％戆弱嚣挂：麓菝Cddl8与重金属 解毒代谢的另一个限速酶一y一豁氨酰一半琬氨璇合成酶基因高度同源(92％)。上 述5介差异片段除了Cdd5来源于基因型“Kt-RBD”外，其宙4个均源于揍因型 “Or-SHO”。说鹾ed抗性和耐性既有共同的髂毒代谢，又存在不同的表逮机辱4， 臻得深入探讨． 6．半胱氨酿合成酶编码基网的克隆：阻“Dr—SHQ”和“Kt—RBD”的cDNA 7bp(W1) 为横板，通过特并引物FCR扩增，从“Dr-SIIQ”的cDNA中获得长度52 其中W1与w2仅宥5个碱基的萎箨，二者与印度芥菜、拟南莽等植物编码半耽氨 酸合成酶的eDNA有99％一92％的同源性．说明已