水稻（oryz sativa l.）锌高效营养生理机制研究.pdfVIP

中文摘要 sativa 水稻(OryzaL．)缺锌作为一种广泛分布的缺素问题，严重限制着水稻 产量，锌高效品种是指在缺锌条件下能够维持较好的长势及较高的产量的水稻品 种。本论文以水稻锌高效品种(IR8192)及锌低效品种(--九丰)为供试材料， 采用螯合剂培养方法，运用叶绿素荧光、低温荧光、透射电镜、生物信息学分析 及RT．PCR等技术手段，较系统地对水稻锌高效营养在光合反应、生理及形态响 应、ZIP转运子基因表达等方面的机制进行了初步的探讨，取得的主要研究结果 如下： 1、在潜在缺锌(pZn2+=11．0)条件下，两基因型水稻的总根长、根总表面 积、根总体积及总根数等根部参数都出现一定程度的适应性增加，但锌高效品种 IR8192相对于对照的增加率要高于低效品种二九丰，IR8192主要通过增加细根数 及根总长来适应缺锌条件；在极度缺锌条件下，以上根形态参数则被降低，但二 九丰的降低幅度要显著高于IR8192。缺锌首先导致根尖细胞中的质膜及线粒体的 超微结构异常，在潜在缺锌条件下，二九丰的根尖中出现许多肿胀的线粒体，但 相同条件下1R8192的根尖超微结构则无明显变化；在极度缺锌条件下 (pZn2+11．5)，两品种根尖均出现空泡及质壁分离等严重结构损伤现象。这些 结果表明，锌高效品种IR8192在缺锌条件下能够维持结构完整、功能健全的发 达根系，这可能是水稻锌高效的重要生理机制之一。 2、两个水稻品种根系分泌物中，检测出的低分子量有机酸主要有草酸和柠 檬酸，结果显示，缺锌条件显著提高两品种水稻根系草酸分泌量，IR8192在缺锌 条件下的根系分泌物中柠檬酸含量要高于对照，而二九丰则呈下降趋势；在缺锌 条件下IR8192根部总酚酸及可溶性糖的分泌量亦高于二九丰，表明在缺锌条件 下，IR8192根部分泌更大量的有机小分子用于活化根际的锌。在根内，缺锌条件 下IR8192苹果酸及柠檬酸与对照的比率均小于二九丰，与此相对的是地上部相 对含量均高于二九丰，根据Zn．苹果酸穿梭模型，表明11t．8192在缺锌条件下能够 更有效地将锌与有机酸的螯合体向地上部运输。柠檬酸脱氢酶及琥珀酸脱氢酶在 两品种间均无显著差异，但IR8192根内苹果酸脱氢酶活性则显著高于二九丰， 结合植物各部有机酸含量数据，锌高效品种在受缺锌胁迫下，苹果酸脱氢酶 IV (MDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)应该主要是作用在有利于苹果酸合成的方向， 并结合更多的锌向植物地上部运输。 3、随着锌离子活度的下降，细胞膜脂过氧化加重，其中二九丰的膜脂过氧 化更为严重；缺锌处理对二九丰的H202含量、质膜透性及游离脯氨酸含量的增幅 亦显著高于IR8192，表明二九丰所受氧化胁迫程度要高于IR8192。缺锌处理后 高效品种，与二九丰相比，在缺锌条件下能够保持更高的抗氧化酶酶活，使体内 活性氧自由基引起的氧化胁迫保持在较低水平，进而维系植物的正常代谢功能， 这可能是IR8192内锌高效营养的重要机制之一。 4、缺锌显著降低两水稻品种叶片中的叶绿素含量、叶绿素a／b比率、净光合 速率、Fv／Fm及Fv／Fo值，表明光系统II的内部结构已经受到破坏。与锌高效品 种IR8192相比，二九丰的以上参数在缺锌处理下的降低比率要更大。77K低温荧 光光谱亦显示，缺锌条件阻碍了IR8192光系统II向光系统I传递的激发能，但相 同条件下二九丰的光谱不成谱形，表明此时二九丰的光合中心已经受到严重损 伤。透射电镜显示，缺锌引起叶片叶绿体超微结构的异常，但在相同的缺锌水平 下，IR8192能够保持L?,--九丰更完整的叶绿体超微结构。这些结果表明，缺锌首 先引起叶片光合单位的减少，同时光合单位的光合能力也受到抑制，锌高效品种 则能在缺锌条件下保持较低效品种更多的光合单位及更高效的光合能力。 5、ZIP(ZRT，IRT．1ike protein)家族是广泛存在于动植物中的转运蛋白，具 Markov 有锌、铁、铜等多种过渡金属元素转运功能。基于隐马可夫模型(hidden 系统的研究，并利用RT．PCR分析比较了它们在不同锌效率水稻中的表达差异。 序列分析表明，该家族成员分布在8条染色体上，大