玉米叶序调控相基因zmedp的克隆及功能研究.pdfVIP

摘 要 对生叶序玉米是一个新的变异类型，其特征是在茎秆的同一节点生长两片对生叶 片，是发育生物学研究的重要遗传资源。本研究以三组对生玉米、互生玉米近等基因 系为材料，通过基因芯片的方法寻找并得到可能是调控叶序发生的候选基因，我们将 其命名为Z?l如勿。通过删a妇过量表达载体和干涉表达载体进行遗传转化，并采用 ELISA的方法比较野生植株和z拖咖转化植株进行细胞分裂素和生长素的含量，同 时分析了水稻同源基因仍e咖，获得了如下结果： 1、通过R1’-PCR获得幻庇咖的全长，并构建了过量表达载体和干涉表达载体。通过 原位转化获得了z讹勿的过表达转基因玉米和干涉表达转基因玉米植株，通过 PCR筛选出干涉转基因植株。 2、通过半定量的方法，我们对刎bdp进行组织特异性表达分析。结果显示z旒dp 基因在根、茎、叶以及茎尖均有表达；在茎尖表达最强烈，其次是根，再次是茎， 在叶片中表达量最少。 进行亚细胞定位分析，结果显示删．edp与GFP载体的融合蛋白定位于细胞核中。 4、采用ELISA的方法比较对照玉米植株和转基因玉米植株中细胞分裂素和生长素 的含量差异，结果表明：在转基因干涉植株中细胞分裂素含量降低，而生长素含 量升高。这说明勿4砌对细胞分裂素和生长素的合成有作用，在玉米的研究中尚 未有过对该基因的报道，是一个新的调控内源激素的基因。 通过RT-PCR获得，并构建了干涉表达载体。再通过农杆菌介导的方式，获得了 干涉表达的转基因水稻植株。通过PCR筛选出转基因植株。 关键词：玉米，叶序，对生，过量表达，RNA干涉 Abs仃act Maize丽mthe iIl andalso ears iS觚abe玎硼t oppositephyllotaXyiIlitiatillg o即ositepairs mutaIlt．T11e characterisanew of locationofmaizea11ditis oppositephyllotaXy typephyllota)【y alsoa mat两altomaize and tlle stIldied娃le precious breedillgpl锄t eVolution．MeⅡlodinggenecbjp，we diff．erenceofbet、7∞enMaizewitllⅡle andaltemate at opposite ph姐lota)【y 5003D／d．The called con仃olthe ofMaize、衍tllme gene，仃eannentZmP咖，may deVelop opposite iIl3-leVelofMaize谢tllnle alldaltemate research phyllota)【y opposite phyllo协Xy．Tlleof撇勿geIle is them01ecular of vectora11d aIld伪e咖geIle byconsmlcting regulationoVereXpression RNAi Vector．Andwe selectedinbreedlinesincludedwildmaize expression and仃．觚sgeIlic